2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:(1)研究支氣管哮喘(簡稱哮喘)大鼠核因子kB(NF-kB)在哮喘急性發(fā)作中的作用;(2)探討NF-kB與丙二醛(MDA)、還原型谷光甘肽(GSH)的關(guān)系及其對氣道炎癥形成的影響;(3)研究姜黃素對NF-kB及其轉(zhuǎn)錄因子活性的調(diào)控作用。 方法:36只雄性SD大鼠隨機(jī)分成3組,分別是正常對照組(A組)、哮喘組(B組)、姜黃素組(C組),每組12只,用卵白蛋白(OVA)制備哮喘大鼠模型,A組用生理鹽水代替OVA進(jìn)行致敏和激發(fā)。

2、各組大鼠于末次激發(fā)后,麻醉并放血活殺,留取血清分別以硫代巴比妥酸法(TBA法)和二硝基苯甲酸法測定血清中的丙二醛(MDA)和還原型谷胱甘肽(GSH)的濃度;各組每只大鼠均經(jīng)肺門結(jié)扎后右肺行支氣管肺泡灌洗并留取支氣管肺泡灌洗液(BALF),對BALF中的細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)和分類;同時也以上述兩種方法測定各組BALF中的MDA和GSH含量,免疫組化法檢測NF-kBp65在支氣管上皮細(xì)胞及其他炎癥細(xì)胞的表達(dá)變化。光鏡下觀察支氣管周圍炎癥浸潤和氣道、

3、肺小動脈平滑肌增殖情況;透射電鏡(TEM)觀察各組支氣管上皮細(xì)胞、肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞及肺細(xì)小動脈超微結(jié)構(gòu)的變化。將各組血清和BALF測得的MDA和GSH值行統(tǒng)計學(xué)分析比較其差異;將各組免疫組化的結(jié)果經(jīng)圖像分析儀得到的平均吸光度(LD)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。 結(jié)果: (1)BALF中的炎癥細(xì)胞情況:B組BALF中細(xì)胞總數(shù)[(5.64±1.12)×10<'9>/L]顯著高于A組、C組[分別為(2.58±0.22)×10<'9>/L、

4、(3.49±0.97)×10<'9>/L](p<0.01)。B組BALF中嗜酸細(xì)胞(EOS)、中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞百分比[分別為(11.13±3.65)%、(15.37±4.13)%和(21.21±4.27)%],分別顯著高于A組[分別為(1.25±0.56)%、(11.02±3.02)%、(13.12±4.13)%] (p<0.01);C組的EOS的百分比是(5.67±2.16)%顯著低于B組(p<0.01); C組的中性粒細(xì)胞的百分

5、比是(13.46±1.69)%顯著低于B組(p<0.05)。 (2)肺組織病理改變光鏡觀察結(jié)果:B組大鼠肺組織切片HE染色可見支氣管和血管周圍炎性細(xì)胞浸潤,以淋巴細(xì)胞、EOS和中性粒細(xì)胞為主,氣道腔內(nèi)可見黏液栓,氣道上皮多處斷裂,并常有基底膜增厚和平滑肌肥大增生等表現(xiàn)。C組的上述改變程度明顯比B組的改變輕,A組則無上述表現(xiàn)。 (3)肺組織超微結(jié)構(gòu)觀察結(jié)果:電鏡下A組(正常對照組)顯示正常的肺泡隔和肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞,支氣管纖毛上皮

6、細(xì)胞的纖毛排列整齊;B組肺泡隔明顯增厚,細(xì)胞成分增多(包括中性粒細(xì)胞和EOS等)基底膜增厚,肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞腫脹,部分脫落在肺泡中,出現(xiàn)板層小體空泡變性現(xiàn)象,支氣管上皮細(xì)胞纖毛排列稀疏或斷裂。C組肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞板層小體空泡變性現(xiàn)象不明顯,支氣管上皮細(xì)胞纖毛排列尚整齊。 (4)血清及BALF中IL-5的測定結(jié)果:B組大鼠血清中IL-5濃度為[26.61±2.84(ng/ml)],明顯高于C組和A組[分別為9.56±1.61、1.

7、85±0.56(ng/ml)(均為P<0.01)。C組血清的IL-5濃度則顯著高于A組(P<0.01)。B組大鼠BALF中IL-5濃度為[24.28±2.72(ng/ml)],明顯高于C組和A組[分別為8.57±1.05、1.31±0.19(ng/ml)](均為P<0.01)。A組BALF的IL-5濃度則顯著低于C組(P<0.01)。 (5)血清及BALF中丙二醛(MDA)的測定結(jié)果:B組大鼠BALF中丙二醛(MDA)濃度為[5

8、.99±0.45(nmol/ml)],明顯高于A組、C組[分別為1.71±0.37(nmol/ml)、1.89±0.30(nmol/ml)](均為P<0.01)。B組大鼠血清丙二醛(MDA)濃度為[7.05±2.09(nmol/ml)],明顯高于C組和A組[分別為3.50±1.01、2.64±0.70(nmol/ml)](均為P<0.01)。 (6)血清及BALF中還原型谷胱甘肽(GSH)的測定結(jié)果:B組大鼠血清還原型谷胱甘肽(

9、GSH)的濃度[119.90±31.36(mg/L)]顯著低于C組和A組[分別為(184.30±36.29)mg/L、(283.84±68.20)mg/L](均為P<0.01)。B組大鼠BALF中還原型谷胱甘肽(GSH)的濃度(87.37±16.86)mg/L顯著低于C組和A組[分別為(138.99±59.43)mg/L、(231.20±25.81)mg/L](均為P<0.01)。 (7)肺組織NF-kBp65免疫組化的結(jié)果:B

10、組顯示支氣管上皮細(xì)胞、炎性細(xì)胞(淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、EOS)及肺泡上皮細(xì)胞的胞漿和胞核均呈棕黃色且著色較深,其吸光度(LD)(0.256±0.063)顯著高于A組(0.034±0.008)(P<0.01)。C組各種細(xì)胞以胞漿著色為主,顏色變淺,胞核著色明顯減少,吸光度(LD)為0.104±0.056,顯著低于B組(P<0.01)。 (8)肺組織Eotaxin免疫組化的結(jié)果:以支氣管上皮細(xì)胞胞漿著色為主,胞核陰性。B組著色較深,吸光度(L

11、D)(0.197±0.055)顯著高于A組(0.010±0.005)(P<0.01);C組的上皮細(xì)胞顏色變淺,吸光度(LD)0.115±0.010,顯著低于B組(P<0.01)。 (9)相關(guān)分析結(jié)果:各組NF-kBp65的LD與Eotaxin的LD、BALF中的IL-5濃度、MDA的濃度、EOS的含量均分別呈非常顯著正相關(guān)。NF-kBp65的LD與各組BALF中的GSH的濃度呈顯著負(fù)相關(guān)。 結(jié)論: (1)哮喘大鼠

12、肺組織NF-kBp65活性增強,氣道上皮細(xì)胞及多種炎性細(xì)胞是主要的表達(dá)細(xì)胞。NF-kB的轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物Eotaxin、IL-5合成也增加,說明哮喘存在NF-kB信號通道過度激活。 (2)NF-kBp65、Eotaxin、IL-5的含量與MDA均呈正相關(guān),而與GSH均呈負(fù)相關(guān)。氧化亢進(jìn)可能是NF-kB信號通路激活的直接誘因。 (3)姜黃素能抑制NF-kB的活性,通過抑制NF-kB向核內(nèi)轉(zhuǎn)移與DNA的結(jié)合而減少其轉(zhuǎn)錄的炎性介質(zhì)的合

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