表達(dá)狂犬病毒糖蛋白的重組新城疫病毒抑制肺腺癌細(xì)胞株遷移活性研究.pdf

1、目的:將表達(dá)狂犬病毒糖蛋白的重組新城疫病毒(Newcastle disease virus expressing therabies virus glycoprotein，rl-RVG)感染至體外培養(yǎng)的人肺腺癌A549細(xì)胞、小鼠肺腺癌LA795細(xì)胞，觀察重組新城疫病毒rl-RVG對(duì)肺腺癌細(xì)胞株A549、LA795的遷移影響，初步探討重組新城疫病毒抑制細(xì)胞遷移及其可能的機(jī)制。
　　方法:重組新城疫病毒rl-RVG直接感染A549、L

2、A795細(xì)胞為rl-RVG實(shí)驗(yàn)組，新城疫病毒LaSota株處理的A549、LA795細(xì)胞組及未感染病毒的A549、LA795細(xì)胞組各自代表NDV對(duì)照組及空白對(duì)照組。Western blot法檢測(cè)新城疫(Newcastle disease virus，NDV)血凝素-神經(jīng)氨酸酶糖(HN)蛋白及狂犬病毒糖蛋白(Rabies Virus Glycoprotein，RVG)，細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)測(cè)定新城疫病毒使用的最佳作用濃度;劃痕實(shí)驗(yàn)及Transwe

3、ll法測(cè)A549遷移;免疫熒光法檢測(cè)MMP2蛋白表達(dá);Western blot法檢測(cè)E-cadherin、MMP2蛋白表達(dá)。
　　結(jié)果:空白對(duì)照組無(wú)NDV、rl-RVG表達(dá)，rl-RVG僅在感染rl-RVG細(xì)胞組有表達(dá)，NDV在感染rl-RVG細(xì)胞組及感染NDV細(xì)胞組皆有表達(dá);與空白對(duì)照組相比，rl-RVG及NDV稀釋濃度大于5×10-5對(duì)細(xì)胞的增殖有抑制作用(P＜0.05); rl-RVG組遷移的距離及細(xì)胞數(shù)明顯減少(P＜0.0

4、5)。與空白對(duì)照組及NDV感染組相比，免疫熒光法顯示rl-RVG組MMP2蛋白表達(dá)水平減弱(P＜0.05)，MMP2蛋白表達(dá)水平下降(P＜0.05); Western blot法顯示rl-RVG組E-cadherin蛋白表達(dá)水平上調(diào)(P＜0.05)，MMP2蛋白表達(dá)水平下降(P＜0.05)。
　　結(jié)論:成功構(gòu)建的重組新城疫病毒rl-RVG能穩(wěn)定、高效地轉(zhuǎn)染致人肺腺癌A549、小鼠肺腺癌LA795的遷移抑制，并可能通過(guò)影響肺腺癌A5