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1、目的:近年來,人們對(duì)蜘蛛毒素的研究涉及到多個(gè)方面,如鎮(zhèn)痛、抗炎、防治心腦血管疾病、抗腫瘤等,但利用蜘蛛毒素治療腦膠質(zhì)瘤在國(guó)內(nèi)尚未見報(bào)道。本文采用蜘蛛毒素進(jìn)行腦膠質(zhì)瘤的體外抑制敏感試驗(yàn)的意義在于為膠質(zhì)瘤的藥物治療提供多種方法。本研究采用廣西虎紋捕鳥妹粗毒素通過對(duì)腦膠質(zhì)瘤的細(xì)胞毒作用和機(jī)制,并與中華眼鏡蛇粗毒素、順鉑抗腫瘤作用的比較,來闡明蜘蛛毒素有可能成為新一代、有效的抗腫瘤藥。
方法:用含10%小牛血清的RPMI1640培
2、養(yǎng)液于37℃、5% CO2培養(yǎng)箱濕化孵育U251;然后把對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞株接種到96孔板,并分別加入不同濃度等體積蜘蛛毒素、眼鏡蛇毒素及順鉑,每個(gè)濃度設(shè)3個(gè)復(fù)孔,空白對(duì)照組以同容量培養(yǎng)基代替蜘蛛毒素;采用細(xì)胞毒試驗(yàn)(MTT),通過細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率來評(píng)價(jià)蜘蛛毒素、眼鏡蛇毒素及順鉑對(duì)U251的細(xì)胞毒作用。
結(jié)果:虎紋捕鳥蛛毒素、中華眼鏡蛇毒素和順鉑對(duì)膠質(zhì)瘤U251均有抑制作用。1.人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)HWBNSV的細(xì)胞毒性作用是敏感
3、的。2.膠質(zhì)瘤細(xì)胞的抑制率與HWBNSV有明顯的量效關(guān)系,即對(duì)傳代細(xì)胞株產(chǎn)生明顯的抑制作用,劑量越大,抑制作用越明顯。其48h及72h的IC50(半量抑制濃度)分別為82.60 ug/ml和71.12ug/ml,結(jié)果也顯示膠質(zhì)瘤細(xì)胞的抑制率與HWBNSV有一定的時(shí)效關(guān)系;3.U251細(xì)胞系對(duì)各藥物的敏感性來看,三種藥物在48h及72h的IC50依次是82.60ug/ml、54.94ug/ml、94.40ug/ml和71.12ug/ml、
4、39.99ug/ml、85.31ug/ml,其中NNAV較HWBNSV、CDDP對(duì)細(xì)胞株敏感性更強(qiáng),較其他兩者存在顯著性的差異(P<0.05)。
結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)膠質(zhì)瘤體外抑制敏感試驗(yàn)的研究中發(fā)現(xiàn):1.人腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞對(duì)HWBNSV的細(xì)胞毒性作用是敏感的;2.膠質(zhì)瘤細(xì)胞的抑制率與HWBNSV有一定的量效和時(shí)效關(guān)系;3.HWBNSV能夠影響腫瘤細(xì)胞的形態(tài),導(dǎo)致細(xì)胞調(diào)亡;4.U251細(xì)胞系對(duì)各藥物的敏感性來看,HWBNSV相對(duì)
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