兩種早期斷奶補(bǔ)飼模式對羔羊腸道屏障功能發(fā)育的影響.pdf

1、本研究以探討兩種早期斷奶補(bǔ)飼模式對羔羊腸道屏障功能發(fā)育的影響為目的，選用66只5日齡健康雄羔羊（平均體重3.69±0.672 kg）作為供試動物，飼喂代乳料5d后，選取6只羔羊作為對照進(jìn)行屠宰取樣。其余60只羔羊被隨機(jī)分為兩組，每組30只，分別在代乳料的基礎(chǔ)上補(bǔ)飼開食料(CF)、開食料和苜蓿(FF)直至斷奶（38日齡）。斷奶后兩組羔羊均限飼300 g/d粉狀精料(45％玉米粉+20％棉籽餅+15％大豆粉+15％麥麩+12％NaCl+1％

2、NaHCO3+2％CaHPO4)，自由采食苜蓿及飲水。分別于17、24、38、45和66日齡時(shí)屠宰采集血液、腸組織及其內(nèi)容物樣品。血漿中IgA、IgG、IgM、LPS和D-乳酸的含量采用ELISA法測定，十二指腸（絨毛高度、隱窩深度、絨毛高度/隱窩深度）和結(jié)腸（黏膜厚度、肌層厚度）經(jīng)HE染色后于光鏡下測定，十二指腸TER和FD4遷移率用Ussing chamber測定，十二指腸、回腸和結(jié)腸緊密連接蛋白(occludin、claudin-

3、1、claudin-4和ZO-1)、促炎因子（IL-6、IL-1β、TNF-a和IFN-γ）和抑炎因子(IL-10、TGF-β1)mRNA表達(dá)水平利用Real-time PCR測定。此外，本研究還對38日齡羔羊空腸和回腸內(nèi)容物中纖維特征和數(shù)量以及回腸和結(jié)腸內(nèi)容物中擬桿菌數(shù)量進(jìn)行了分析。試驗(yàn)結(jié)果顯示:
　　1.在羔羊發(fā)育過程中，飼料劑型的轉(zhuǎn)變對血漿IgA、IgG和IgM水平的影響不顯著，說明羔羊機(jī)體的免疫功能正常。
　　2.在

4、羔羊發(fā)育過程中，盡管飼料劑型的轉(zhuǎn)變對血漿D-乳酸含量的影響不顯著，但血漿LPS含量升高，胃腸道通透性增加。
　　3.在羔羊發(fā)育過程中，液體型飼料向顆粒料或纖維的轉(zhuǎn)變使十二指腸絨毛高度降低，隱窩深度增加，絨毛高度/隱窩深度則相應(yīng)降低，十二指腸TER降低，F(xiàn)D4遷移率升高，claudin-4 mRNA表達(dá)水平降低，腸道通透性增加，但由于TGF-β1在mRNA水平上的高表達(dá)及其線性增加提高了其他緊密連接蛋白表達(dá)，促進(jìn)了腸屏障損傷的修復(fù)，

5、但其功能的恢復(fù)滯后于腸形態(tài)的重建。
　　4.在羔羊發(fā)育過程中，顆粒料向粉狀精料和纖維的轉(zhuǎn)變使回腸INF-a和IFN-γ mRNA表達(dá)水平增加，claudin-1、claudin-4和occludin mRNA表達(dá)水平降低，腸屏障功能降低，ZO-1 mRNA表達(dá)穩(wěn)定，提示飼料劑型轉(zhuǎn)變可能沒有影響細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)，但纖維補(bǔ)飼模式下羔羊回腸緊密連接蛋白和細(xì)胞因子mRNA表達(dá)不受飼料劑型轉(zhuǎn)變的影響。
　　5.在羔羊發(fā)育過程中，相對于FF

6、組，顆粒料向粉狀精料和纖維的轉(zhuǎn)變使CF組結(jié)腸黏膜厚度增加，但兩組結(jié)腸肌層厚度及其緊密連接蛋白和細(xì)胞因子mRNA表達(dá)水平均不受飼料劑型轉(zhuǎn)變的影響，且結(jié)腸的屏障功能可能相對更強(qiáng)。
　　6.在羔羊發(fā)育過程中，除了纖維補(bǔ)飼模式在回腸表現(xiàn)出一定優(yōu)勢外，兩種早期斷奶補(bǔ)飼模式間血漿免疫球蛋白水平、腸道通透性、十二指腸和結(jié)腸形態(tài)結(jié)構(gòu)及其緊密連接蛋白和細(xì)胞因子mRNA表達(dá)水平的差異均不明顯。
　　7.38日齡FF組羔羊空腸和回腸內(nèi)容物中除了片

7、狀纖維外，還有很多的長條狀纖維且纖維面積大于CF組，F(xiàn)F組羔羊空腸內(nèi)容物中纖維數(shù)量顯著高于CF組（P＜0.05），但兩處理組間回腸內(nèi)容物中纖維數(shù)量的差異不顯著(P＞0.05)，提示相對于十二指腸、回腸和結(jié)腸，纖維補(bǔ)飼可能對空腸形態(tài)的影響更顯著。
　　8.在38日齡，兩處理組間羔羊回腸和結(jié)腸內(nèi)容物中擬桿菌（G-）數(shù)量的差異均不顯著(P＞0.05)。
　　綜上所述，在羔羊發(fā)育過程中，飼料劑型的轉(zhuǎn)變對小腸屏障功能的影響大于纖維補(bǔ)飼