慢性HCV感染與LA-DRB1-1301，1302等位基因的相關(guān)性研究.pdf

1、背景與目的；HCV感染的顯著特征是慢性化率很高。一些肝外組織可能成為HCV的儲存場所，不利于徹底清除病毒。進一步探討肝外細胞尤其外周單個核細胞(PBMC)的HCV感染對丙型肝炎慢性化有重要意義?，F(xiàn)代研究認為慢性丙型肝炎肝臟組織損傷主要是由于機體免疫應答所致，宿主免疫應答的高低決定著丙型肝炎的發(fā)生和發(fā)展。由于人類白細胞抗原(humanleucocyteantigen，HLA)復合體可以調(diào)控機體免疫應答，所以HLA復合體與HCV感染之間的關(guān)

2、系日益受到重視。HLA-Ⅰ類和Ⅱ類抗原分別是CD8和CD4分子的配體，可穩(wěn)定和促進免疫細胞間相互結(jié)合、增強免疫應答的啟動或效應功能，與抗HCV免疫反應有著密切的關(guān)系。某些特殊的HLA基因型可能影響著HCV感染后機體免疫的強弱，從而影響丙型肝炎的發(fā)生和發(fā)展。新近研究表明HLA-Ⅱ抗原HLA-DRB1*1301,1302在乙型肝炎病毒清除中發(fā)揮重要作用，探討HLA-DRB1*1301,1302基因?qū)β訦CV感染及其慢性化的影響有重要意義。

3、 方法；根據(jù)GeneBank提供的序列，oligo軟件PRIMER分析進行引物設(shè)計，采用套式PCR檢測血清及外周單個核細胞(PBMC)中HCVRNA，產(chǎn)物進行瓊脂糖凝膠電泳，用DNAMarker為分子量標準，確定PCR擴增產(chǎn)物的大小和擴增特異性。采用酚-氯仿法從血液中提取基因組DNA,利用計算機軟件自行設(shè)計HLA-DRB1*1301，1302特異性引物，根據(jù)人工合成的引物，進行PCR擴增，對慢性丙型肝炎患者進行HLA-DRB1*

4、1301，1302的檢測，，然后提純進行測序分析。采用SSPS11.0軟件進行統(tǒng)計學分析。 結(jié)果；61例慢性丙型肝炎患者中血清HCVRNA陽性41(67.2％)例，PBMC-HCVRNA陽性33(54.0％)例，二者有一定相關(guān)性(χ2=18.32P=0.000＜0.05)；但其中3例血清陰性患者PBMC-HCVRNA陽性。41例血清HCVRNA陽性患者中4(9.8％)例HLA-DRB1*1301，1302基因陽性，20例血清HC

5、VRNA陰性患者中7(35.0％)例HLA-DRB1*1301，1302基因陽性，采用fisher精確概率法進行檢驗，差異有統(tǒng)計學意義(P=0.029，OR=0.22)。33例PBMC-HCVRNA陽性患者中3(9.0％)例HLA-DRB1*1301，1302基因陽性，28例PBMC-HCVRNA陰性患者中8(28.6％)例HLA-DRB1*1301，1302基因陽性，差異有統(tǒng)計學意義(χ2=3.889,P=0.049，OR=0.25)