HLA-DRB1，DQB1等位基因多態(tài)性與長壽的關(guān)聯(lián)研究.pdf

1、本文研究目的：人類白細胞抗原復(fù)合體(HumanLeukocytesAntigens，HLA)位于人類第6對染色體的短臂上，是一組緊密連鎖的基因群，即6P2.1.3，全長約3500kb，是人類迄今所知多態(tài)性最豐富的基因系統(tǒng)，其信息量約為人類基因組全部信息量的千分之一。傳統(tǒng)上，HLA基因分為Ⅰ類(HLA-A,B，C等)，Ⅱ類(HLA-DR，DQ，DP等)及Ⅲ類(C2，C4等補體基因)。它們分別編碼三類不同的HLA抗原分子，在產(chǎn)物結(jié)構(gòu)、表達方

2、式、組織分布和功能一上各不相同。其中，Ⅱ類位于D區(qū)，為免疫功能相關(guān)基因(Immunefunctionrelatedgene，Ir)，在免疫應(yīng)答中起重要的作用。正因為HLA在免疫調(diào)節(jié)中的重要地位，國外學者對HLA與長壽關(guān)系的研究極為重視。已有許多研究表明，長壽與機體的免疫系統(tǒng)功能有直接的聯(lián)系，提示決定壽限的遺傳因素可能存在于控制免疫功能的某些基因上，特別是HLA-Ⅱ類基因。因此，多數(shù)學者都把研究的重點集中于HLA-Ⅱ類基因，已有較多的長壽

3、與HLA-Ⅱ類基因關(guān)聯(lián)研究的報道。然而，遺憾的是因人種、民族、地域及研究角度等不同，所得的結(jié)論差別很大，甚至得出相反的結(jié)果。這正是HLA系統(tǒng)復(fù)雜性的表現(xiàn)。國內(nèi)在這方面的研究與發(fā)達國家比較顯得滯后得多，目前尚缺乏長壽群體全面、系統(tǒng)的HLA參數(shù)。通過對大連市內(nèi)同一地域的長壽人群HLA-DRB1，DQB1等位基因的多態(tài)性分布特點研究，旨在探討長壽人群中HLA-DRB1,DQB1與長壽的關(guān)系，為揭開長壽的奧秘提供理論依據(jù)。 研究方法：應(yīng)

4、用序列特異的寡核苷酸探針分析法(sequencespecificoligonucleotideprobes，PCR-SSO)對遼寧省大連市29名90-98歲老人(91±2歲)和隨機選取大連地區(qū)無償獻血志愿者98名，身體健康，體檢標準符合“全國采供血管理規(guī)范”。家族無遺傳病史，年齡在18-55周歲(38±12)歲，男性49名，女性49名進行HLA-DRB1，DQB1基因分型。樣本采集，采靜脈血2ml，EDTA抗凝。HLA-DRB1、DQB

5、1基因分型方法，采用SSO方法。首先，提取DNA，進行PCR擴增。然后，按試劑盒說明書進行變性與中和后再與磁珠雜交，用SAPE染色，洗滌后，讀板，計算機自動按順序讀取數(shù)據(jù)并分析出DRB1,DQB1的特異性。 研究結(jié)果：長壽組HLA-DRB1*07基因頻率(17.2﹪)明顯高于對照組(7.7﹪)，P=0.043,有統(tǒng)計學顯著性差異。采用多元判別分析法發(fā)現(xiàn)HLA-Ⅱ類基因的長壽組合模式的推算公式，其判別方程為Y=0.579×DRB1

6、*01+2.462×DRB1*03-0.060×DRB1*04+3.865×DRB1*07+DRB1*08×0.149-0.342×DRB1*09-0.342×DRB1*10+0.519×DRB1*11+0.250×DRB1*12-0.321×DRB1*13+2.387×DRB1*14+DRB1*15×0.220-DQB1*02×1.429+DQB1*03×0.997+DQB1*03×0.438-DQB1*04×0.308+DQB1*0