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文檔簡介
1、豬鏈球菌2型(Streptococcus suis 2，SS2)是重要的人獸共患病的病原，能導致人和豬的腦膜炎、敗血癥以及突發(fā)性死亡，其致病機制目前仍不明確。本研究為尋找新的毒力因子，以中國SS2強毒株05ZYH33的基因組為模板，克隆表達了具有酶活性的二肽酶Ⅳ(Dipeptidyl PeptidaseⅣ，DPPⅣ)，通過序列比對顯示05ZYH33中DPPⅣ屬于絲氨酸蛋白酶S15家族，在進化上十分保守，含有絲氨酸蛋白酶的保守序列Gly-
2、X-Ser-X-X-Gly，重組表達的DPPⅣ在適宜pH值(6.5-8.5)、最佳反應(yīng)溫度(37℃)下能夠切割N末端含有X-Pro的底物。Western blot分析顯示重組DPPⅣ具有特異反應(yīng)活性，重組蛋白制備的多克隆抗體具有較高抗體效價，說明重組DPPⅣ具有良好免疫原性。通過流式細胞儀對其進行膜表面定位，顯示DPPⅣ為膜表面蛋白；采用PCR方法檢測DPPⅣ基因在不同血清型豬鏈球菌中的分布情況，嘗試建立一種基于DPPⅣ的可檢測豬鏈球菌
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