IL-18對人PBMCs趨化因子受體表達(dá)的影響.pdf

1、炎癥細(xì)胞的浸潤、特別是單核-巨噬細(xì)胞及淋巴細(xì)胞浸潤在大多數(shù)原發(fā)性及繼發(fā)性腎臟疾病的發(fā)病過程中起重要作用。趨化因子(chemokines)及趨化因子受體(chemokinereceptors)是介導(dǎo)炎癥細(xì)胞向靶組織浸潤的主要介導(dǎo)者，多種腎臟疾病均存在趨化因子分泌異常及其相應(yīng)受體表達(dá)異常。研究發(fā)現(xiàn)外周循環(huán)白細(xì)胞介素18(interleukin18，IL-18)水平在多種急、慢性腎臟疾病中均呈升高狀態(tài)，推測IL-18可能部分通過促進(jìn)循環(huán)白細(xì)胞

2、趨化因子受體的表達(dá)而參與腎臟疾病的發(fā)病過程。本研究通過檢測正常人外周血單個核細(xì)胞(peripheralbloodmononuclearcells，PBMCs)在IL-18刺激下其趨化因子受體CCR2和CXCR3的表達(dá)是否發(fā)生變化，旨在進(jìn)一步探討IL-18在腎臟疾病中的可能作用機(jī)制。 [方法]應(yīng)用Ficoll梯度密度離心法分離健康成人PBMCs。采用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測新鮮分離PBMCsCCR2、CXCR3表達(dá)陽性細(xì)胞百分率。

3、并分別用終濃度為0ng/ml、1ng/ml、10ng/ml和100ng/ml的IL-18處理體外培養(yǎng)PBMCs24小時和48小時，然后應(yīng)用FCM檢測PBMCsCCR2、CXCR3表達(dá)陽性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)，用半定量逆轉(zhuǎn)錄-多聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測PBMCsCCR2、CXCR3mRNA表達(dá)量。 [結(jié)果] 1.FCM證實新鮮分離的健康成人PBMCs表面均能表達(dá)趨化因子受體CCR2、CXCR3。其中CCR在23.3％到48.

4、6％之間，CXCR3在29.7％到60.1％之間。 2.FCM檢測顯示：不同濃度IL-18刺激后，在24小時和48小時兩個時間點，PBMCsCCR2和CXCR3表達(dá)陽性細(xì)胞百分率與對照組(IL-18濃度0ng/m1)比較均無統(tǒng)計學(xué)差異。 3.RT-PCR半定量分析顯示：IL-18呈劑量與時間依賴性增加PBMCsCCR2mRNA表達(dá)量；IL-18對PBMCsCXCR3mRNA表達(dá)量無影響。 [結(jié)論]腎病狀態(tài)下，外周