定量檢測TRECs在異體造血干細(xì)胞移植中的作用和意義研究.pdf

1、目的：分析T細(xì)胞受體重排刪除環(huán)（T-cell receptor rearran-gement excision circles，TRECs）水平的變化，評(píng)價(jià)異體造血干細(xì)胞移植（allo-HSCT）后T細(xì)胞免疫重建的情況。
　　 方法：收集接受allo-HSCT治療的11名白血病患者移植前、移植之后4周內(nèi)、4-8周、9-12周等不同時(shí)間點(diǎn)的外周血樣本，臨床觀察移植后并發(fā)癥（如移植物抗宿主?。╣raft versus host di

2、sease，GVHD）發(fā)生及原發(fā)病復(fù)發(fā)的情況。分離外周血單個(gè)核細(xì)胞（peripheral blood mononuclear cells，PBMNCs）后，采用間接免疫熒光法檢測CD45RA+和CD45RO+細(xì)胞陽性率，提取DNA后采用實(shí)時(shí)定量PCR定量檢測TRECs水平，結(jié)果以“TRECs拷貝數(shù)1000個(gè)PBMNCs”表示。
　　 結(jié)果：CD45RA細(xì)胞陽性率在allo-HSCT后4周內(nèi)明顯低下，隨后逐步上升，至allo-HS

3、CT后9～12周又出現(xiàn)少許回落：而CD45RO細(xì)胞陽性率在HSCT后逐漸升高，至allo-HSCT后9～12周才出現(xiàn)明顯降低；allo-HSCT4周內(nèi)、4～8周時(shí)間段的CD45RA+細(xì)胞/CD45RO+細(xì)胞的比值與allo-HSCT前相比均有所減小，提示allo-HSCT后8周內(nèi)以CD45RO+細(xì)胞的擴(kuò)增為主?；颊遖llo-HSCT前的外周血TRECs水平平均為0.8546±1.30272拷貝/1000 PBMNCs。在allo-HSC

4、T后4周內(nèi)，外周血TRECs水平稍許上升，4周后明顯下降，9～12周仍平穩(wěn)于較低狀態(tài)。有GVHD史移植病人的外周血TRECs水平顯著降低，明顯低于無GVHD史移植病人的外周血TRECs水平，甚至趨于基線水平。TRECs還可能作為allo-HSCT相關(guān)的預(yù)后因子，外周血TRECs水平低下可能預(yù)示移植后的早期復(fù)發(fā)。
　　 結(jié)論：結(jié)合T細(xì)胞亞群和TRECs等指標(biāo)，對(duì)allo-HSCT后的T細(xì)胞免疫重建進(jìn)行定期監(jiān)測，能夠更為確切地評(píng)價(jià)移