環(huán)氧化酶-2及相關(guān)因子在閉合性機(jī)械性顱腦損傷中的表達(dá)和意義.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)通過復(fù)制Marmarou's大鼠閉合性顱腦損傷模型，采用組織芯片及免疫組化技術(shù)，研究閉合性腦損傷后COX-2、GluR2、PAF-R在腦組織中的表達(dá)部位、時(shí)序性特點(diǎn)及三者之間的相互關(guān)系。 方法：采用清潔級SD大鼠88只，體重350-400g。隨機(jī)分為對照組及損傷后1h組、2h組、4h組、8h組、12h組、24h組、2d組、3d組、5d組、7d組。 復(fù)制Marmarou's落體打擊損傷模型。進(jìn)行4％多聚甲醛灌注

2、固定、取材。HE、甲苯胺藍(lán)染色觀察病理改變。用組織芯片儀制作組織芯片，SP法檢測腦組織COX-2、GluR2、PAF-R的表達(dá)情況。采用Mias2000圖像分析系統(tǒng)采集并計(jì)算陽性細(xì)胞數(shù)和陽性細(xì)胞面積。以P＜0.05為顯著性差異的水準(zhǔn)。全部數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5forwindows分析軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)處理。 結(jié)果：1病理學(xué)改變：損傷組可見硬膜下出血、蛛網(wǎng)膜下腔出血。皮質(zhì)、海馬等部位部分神經(jīng)元深染、固縮，部分腫脹、深染。 2

3、COX-2免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：對照組頂葉皮層、海馬腦底皮層部位均有少量免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞表達(dá)，損傷后陽性細(xì)胞表達(dá)增多。損傷后1h-3d，頂葉皮層陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，5d時(shí)差別有顯著意義(p＜0.05)，12h達(dá)最大值；損傷后2h-5d，COX-2免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，8h時(shí)達(dá)最大值。 損傷后1h-5d，CA4區(qū)COX-2免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞數(shù)與對照組比

4、較差別有極顯著意義(p＜0.01)，7d差別有顯著意義(p＜0.05)，8h達(dá)最大值；損傷后1h-3d，陽性細(xì)胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，5d時(shí)差別有顯著意義(p＜0.05)，8h達(dá)最大值。 損傷后1h-5d，CA3區(qū)COX-2免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，8h達(dá)最大值；損傷后1h-5d，陽性細(xì)胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，8h達(dá)最大值。

5、損傷后1h-3d，腦底皮層COX-2免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達(dá)最大值；損傷后1h-5d，陽性細(xì)胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達(dá)最大值。 3GluR2免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：對照組項(xiàng)葉皮層、海馬等部位均有免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞大量表達(dá)。損傷后陽性細(xì)胞表達(dá)減少。損傷后1h-7d，頂葉皮層GluR2免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12

6、h達(dá)最低值；損傷后1h-7d，陽性細(xì)胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，24h達(dá)最大值。 損傷后2h-3d，CA4區(qū)GluR2免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，5d時(shí)差別有顯著意義(p＜0.05)，12h達(dá)最大值；損傷后2h-7d，陽性細(xì)胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達(dá)最低值。損傷后2h-7d，CA3區(qū)GluR2免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)與對照組比較差別有極顯

7、著意義(p＜0.01)，5d時(shí)差別有顯著意義(p＜0.05)，24h達(dá)最低值；損傷后2h-7d，陽性細(xì)胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，24h達(dá)最低值。 損傷后2h-7d，腦底皮層GluR2免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達(dá)最低值；損傷后1h-7d，陽性細(xì)胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達(dá)最低值。 4PAF-R免疫組織化學(xué)染色結(jié)果：對照組

8、頂葉皮層、胼胝體內(nèi)有較多免疫反應(yīng)陽性膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)。損傷后，陽性膠質(zhì)細(xì)胞表達(dá)減少。損傷后1h-2d，頂葉皮層PAF-R免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，3d、5d時(shí)差別有顯著意義(p＜0.05)，12h達(dá)最低值；損傷后1h-7d，陽性細(xì)胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，12h達(dá)最低值。 損傷后1h-7d，胼胝體內(nèi)PAF-R免疫反應(yīng)陽性細(xì)胞計(jì)數(shù)與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.0

9、1)，12h達(dá)最低值；損傷后1h-7d，陽性細(xì)胞面積與對照組比較差別有極顯著意義(p＜0.01)，24h達(dá)最低值。 結(jié)論：1腦損傷后PAF-R表達(dá)在損傷后1h下降，12-24h達(dá)最低，7d時(shí)仍低于正常。表達(dá)的細(xì)胞以神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞為主，及少量的錐體細(xì)胞表達(dá)。2正常時(shí)GluR2在皮質(zhì)、海馬錐體細(xì)胞均有表達(dá)，損傷后各部位表達(dá)基本一致，損傷后1h后下降，12-24h達(dá)最低值，7d時(shí)有些部位仍低于正常。3腦損傷后，COX-2表達(dá)在1-2h開