豬滲出性皮炎病原的分離鑒定及間接ELISA檢測(cè)方法的研究.pdf

1、豬葡萄球菌(Staphylococcus hyicus)是小豬滲出性皮炎的病原。滲出性皮炎典型病例表現(xiàn)為哺乳豬和斷奶仔豬的一種急性和超急性傳染病，患豬全身性皮炎可導(dǎo)致腹水和死亡。5-6周齡的小豬通常在感染后4-6d發(fā)病。臨床癥狀為皮膚發(fā)紅且皮膚排出物增多，在腋部和肋部出現(xiàn)薄的、灰棕色片狀滲出物，3-5d擴(kuò)展到全身各處，其顏色很快變化并富含脂質(zhì)。食欲不振和脫水是本病的特征。目前，我國對(duì)滲出性皮炎的報(bào)道只限于其病原菌的分離鑒定和抗生素治療，

2、而對(duì)該病的病原學(xué)、發(fā)病機(jī)理及診斷方法等方面的研究尚處于空白。應(yīng)用細(xì)菌分離鑒定、藥敏實(shí)驗(yàn)等檢測(cè)方法耗時(shí)費(fèi)力，間接ELISA檢測(cè)方法的建立能快速、批量地進(jìn)行抗體檢測(cè)，達(dá)到滲出性皮炎流行病學(xué)調(diào)查的目的。本研究對(duì)滲出性皮炎的病原進(jìn)行分離鑒定，利用PCR技術(shù)擴(kuò)增豬葡萄球菌表皮脫落毒素基因，通過連接、轉(zhuǎn)化、酶切等方法構(gòu)建了表皮脫落毒素的體外表達(dá)系統(tǒng)，重組菌命名為pET32a-ExhB，IPTG誘導(dǎo)表達(dá)，用表達(dá)蛋白作包被抗原，進(jìn)行間接ELISA抗體檢