灰樹(shù)花與貴州天名精中小分子化合物抗腫瘤作用研究.pdf

1、灰樹(shù)花屬擔(dān)子菌亞門(mén)，層菌綱，非褶菌目，多孔菌科，樹(shù)花屬，具有多種生物活性。本實(shí)驗(yàn)室從灰樹(shù)花中得到了3個(gè)甾體類(lèi)化合物，分別為5α，8β-epidioxyergosta-6，22 diene-3β-ol，ergosterol和3β，5α，6β-trihydroxyergosta-7，22-diene。
　　 貴州天名精為菊科植物，其特點(diǎn)為植物體中含有種類(lèi)和含量相對(duì)豐富的倍半萜類(lèi)化合物。研究表明倍半萜類(lèi)化合物具有抗腫瘤和抑制血管新生等

2、多種生物學(xué)功效。本實(shí)驗(yàn)室從本校腦功能基因組學(xué)實(shí)驗(yàn)室獲得2個(gè)從貴州天名精中提取的倍半萜類(lèi)化合物，分別為4-epi-isoinuviscolide和8α，15-dihydroxy-13E-labdene。
　　 本研究首先通過(guò)人乳腺癌細(xì)胞(MCF-7)模型，對(duì)灰樹(shù)花中的3種甾體化合物和貴州天名精中的2種倍半萜類(lèi)化合物進(jìn)行MTT實(shí)驗(yàn)，在這5種待測(cè)小分子化合物篩選出5α，8β-epidioxyergosta-6，22 diene-3β-

3、ol，4-epi-isoinuviscolide和8α，15-dihydroxy-13E-labdene這3種對(duì)MCF-7的增殖抑制比較明顯的小分子化合物。并確定了這3種化合物對(duì)MCF-7細(xì)胞的半抑制濃度(IC50)分別為53.9μmol/L，68.6μmol/L和59.2μmol/L。再利用流式細(xì)胞術(shù)研究這5種小分子化合物對(duì)MCF-7細(xì)胞周期的影響，發(fā)現(xiàn)5α，8β-epidioxyergosta-6，22 diene-3β-ol，4-

4、epi-isoinuviscolide和8α，15-dihydroxy-13E-labdene都能將MCF-7的細(xì)胞周期阻斷在G2/M期，并能促進(jìn)MCF-7凋亡。
　　 在獲得了化合物在MCF-7上的數(shù)據(jù)基礎(chǔ)上，利用人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs)模型，通過(guò)MTT Assay，Cell Scratch Assay，Transwell Assay以及Tubeformation Assay對(duì)篩選出的3種小分子化合物進(jìn)行體外抗血管

5、生成實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)5α，8β-epidioxyergosta-6，22 diene-3β-ol，4-epi-isoinuviscolide和8α，15-dihydroxy-13E-labdene這3種化合物在體外對(duì)VEGF介導(dǎo)的內(nèi)皮細(xì)胞遷移、增殖、成環(huán)和成管具有明顯的抑制作用。利用雞胚尿囊膜模型對(duì)這3種小分子化合物模擬體內(nèi)抗血管生成實(shí)驗(yàn)，結(jié)果表明5α，8β-epidioxyergosta-6，22 diene-3β-ol，4-epi-iso