氯喹增強(qiáng)拓?fù)涮婵刁w外抑瘤的分子機(jī)制探討.pdf

1、中山大學(xué)碩士學(xué)位論文氯喹增強(qiáng)拓?fù)涮婵刁w外抑瘤的分子機(jī)制探討姓名：王堯申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：張曉實(shí)20100527中山大學(xué)碩士學(xué)位論文 氯喹增強(qiáng)拓?fù)涮婵刁w外抑瘤的分子機(jī)制探討治療小鼠黑色素瘤能夠增強(qiáng)放療所誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。因此，氯喹被認(rèn)為具有直接的細(xì)胞毒性作用，或能夠間接的增強(qiáng)放、化療的敏感性。后續(xù)的研究表明在不同的腫瘤細(xì)胞如：乳腺癌、肺癌、結(jié)腸癌、肝癌、胰腺癌、卵巢癌、腦膠質(zhì)瘤等當(dāng)中，氯喹均具有直接細(xì)胞毒性作用。近來，一

2、項(xiàng)隨機(jī)、雙盲、安慰劑對(duì)照的臨床研究表明，氯喹聯(lián)合應(yīng)用傳統(tǒng)的放療及化療能夠有效延長(zhǎng)多形性惡性膠質(zhì)瘤的中位生存時(shí)間。到目前為止，有十幾個(gè)不同的關(guān)于C Q 增敏放、化療的臨床試驗(yàn)正在進(jìn)行當(dāng)中。對(duì)于C Q 的抗腫瘤機(jī)制或許有以下可能，首先C Q 有可能會(huì)影響耐藥蛋白( A T P - b i n d i n g c a s s e t t es u p e r f a m i l yG m e m b e r 2 ，A B C G 2 ) ，它

3、能夠通過提高進(jìn)入細(xì)胞的藥物濃度，促進(jìn)化療藥物的殺傷作用；其次，C Q 有可能通過改變?nèi)苊阁w膜的通透性( L y s o s o m a l m e m b r a n ep e r m e a b i l i z a t i o n ，L M P ) ，從而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的死亡；另外，作為一種自噬抑制劑，C Q 通過改變?nèi)苊阁w內(nèi)的P H 值來破環(huán)自噬溶酶體對(duì)于蛋白質(zhì)的降解，造成L C ．I I 的不斷聚集，從而阻斷了自噬的最后一步；C Q

4、 也能夠通過直接作用于D N A 來殺傷腫瘤細(xì)胞，這種殺傷作用依賴于其作用的濃度與時(shí)間。基于C Q 的多種抗腫瘤機(jī)制，本實(shí)驗(yàn)當(dāng)中，將觀察C Q 與化療藥物T P T 聯(lián)用對(duì)于腫瘤細(xì)胞增殖抑制的影響，并初步探討其可能機(jī)制。方法：應(yīng)用M T T 法檢測(cè)T P T 對(duì)肺癌細(xì)胞A 5 4 9 和結(jié)腸癌細(xì)胞S W 4 8 0 、S W 6 2 0 、C o l 0 2 0 5 、L o V o 的增殖抑制作用，以及C Q 和T P T 聯(lián)合應(yīng)用時(shí)

5、對(duì)A 5 4 9 和L o V o細(xì)胞的增殖抑制作用；共聚焦顯微鏡下觀察胞質(zhì)內(nèi)Y F P ．L C 3 的點(diǎn)狀聚集及A O染色的酸性小體；采用s h R N A 沉默A t 9 5 后應(yīng)用T P T 處理，M T T 法檢測(cè)對(duì)A 5 4 9的生長(zhǎng)抑制，采用s i R N A 沉默B e c l i n l 后應(yīng)用T P T ，臺(tái)盼藍(lán)染色法計(jì)數(shù)L o V o 細(xì)胞死亡率。通過流式細(xì)胞儀檢測(cè)C Q 和T P T 聯(lián)用對(duì)于A 5 4 9 細(xì)胞