調(diào)衡方對Lewis肺癌細胞抑瘤作用及分子機制的研究.pdf

1、目的：
　　本實驗以不同劑量調(diào)衡方(THP)含藥血清對Lewis肺癌細胞進行干預，通過檢測含藥血清對細胞增殖、凋亡的影響研究其抑瘤作用，同時檢測含藥血清對STAT3、STAT5、Bcl-2、Bax基因表達的影響，從而進一步研究THP抑瘤作用的分子機制，為深入認識中醫(yī)藥抗腫瘤作用提供科學依據(jù)。
　　方法：
　　1.制備SD大鼠THP含藥血清:隨機分成4組即THP大、中、小劑量組及正常對照組，每組各8只，連續(xù)給藥5天后，僅

2、給水12h，再給予THP灌胃1天，腹腔麻醉，心臟內(nèi)采血，血清離心并滅活，用0.45um濾器過濾分裝，-70℃冰箱凍存。
　　2.以THP含藥血清大、中、小劑量，AG490(25umol/L)及中劑量THP含藥血清+AG490(25umol/L)對Lewis肺癌細胞進行干預，并設立陰性對照組（SD大鼠正常血清）。
　　3.用MTT法檢測上述六組對Lewis肺癌細胞干預24h、48h、72h后細胞增殖的狀況;吖啶橙染色觀察干預L

3、ewis肺癌細胞的凋亡狀況。
　　4.RT-PCR法檢測不同含藥血清干預后Lewis肺癌細胞中STAT3、STAT5和Bcl-2、Bax的基因表達水平。
　　結果：
　　1.MTT法檢測結果顯示，在不同時間段THP含藥血清對Lewis肺癌細胞增殖有著顯著抑制作用(P＜0.01)，抑制率隨著藥物濃度的增加和干預時間的延長而增高，且中劑量+AG490組比AG490組對Lewis肺癌細胞有明顯的抑制作用（P＜0.01）;

4、r>　　2.吖啶橙染色顯示，THP含藥血清各劑量組均可對Lewis肺癌細胞凋亡起促進作用，其中THP中劑量+AG490組作用最顯著（P＜0.01）;
　　3.RT-PCR法檢測結果顯示，THP含藥血清干預Lewis肺癌細胞后，細胞內(nèi)STAT3、STAT5和Bcl-2均為低表達（P0.01），Bax為高表達（P＜0.01);中劑量+AG490組在六組中STAT3、STAT5和Bcl-2基因表達最低，Bax基因表達最高。
　　結