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文檔簡介
1、目的:
本實驗以不同劑量調(diào)衡方(THP)含藥血清對Lewis肺癌細胞進行干預,通過檢測含藥血清對細胞增殖、凋亡的影響研究其抑瘤作用,同時檢測含藥血清對STAT3、STAT5、Bcl-2、Bax基因表達的影響,從而進一步研究THP抑瘤作用的分子機制,為深入認識中醫(yī)藥抗腫瘤作用提供科學依據(jù)。
方法:
1.制備SD大鼠THP含藥血清:隨機分成4組即THP大、中、小劑量組及正常對照組,每組各8只,連續(xù)給藥5天后,僅
2、給水12h,再給予THP灌胃1天,腹腔麻醉,心臟內(nèi)采血,血清離心并滅活,用0.45um濾器過濾分裝,-70℃冰箱凍存。
2.以THP含藥血清大、中、小劑量,AG490(25umol/L)及中劑量THP含藥血清+AG490(25umol/L)對Lewis肺癌細胞進行干預,并設立陰性對照組(SD大鼠正常血清)。
3.用MTT法檢測上述六組對Lewis肺癌細胞干預24h、48h、72h后細胞增殖的狀況;吖啶橙染色觀察干預L
3、ewis肺癌細胞的凋亡狀況。
4.RT-PCR法檢測不同含藥血清干預后Lewis肺癌細胞中STAT3、STAT5和Bcl-2、Bax的基因表達水平。
結果:
1.MTT法檢測結果顯示,在不同時間段THP含藥血清對Lewis肺癌細胞增殖有著顯著抑制作用(P<0.01),抑制率隨著藥物濃度的增加和干預時間的延長而增高,且中劑量+AG490組比AG490組對Lewis肺癌細胞有明顯的抑制作用(P<0.01);
4、r> 2.吖啶橙染色顯示,THP含藥血清各劑量組均可對Lewis肺癌細胞凋亡起促進作用,其中THP中劑量+AG490組作用最顯著(P<0.01);
3.RT-PCR法檢測結果顯示,THP含藥血清干預Lewis肺癌細胞后,細胞內(nèi)STAT3、STAT5和Bcl-2均為低表達(P0.01),Bax為高表達(P<0.01);中劑量+AG490組在六組中STAT3、STAT5和Bcl-2基因表達最低,Bax基因表達最高。
結
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