PP2A-Aα在肺癌細(xì)胞中的抑瘤機(jī)制.pdf

1、真核生物生命活動(dòng)的所有過程，如細(xì)胞增殖、新陳代謝、生長(zhǎng)發(fā)育以及細(xì)胞分化等，幾乎都受到蛋白質(zhì)磷酸化與去磷酸化作用的調(diào)節(jié)。蛋白激酶和蛋白磷酸酶共同調(diào)控蛋白質(zhì)的可逆磷酸化作用。常見的蛋白磷酸酶主要有PP1、PP2A、PP2B以及PP2C等。在諸多蛋白磷酸酶中蛋白磷酸酶2A(Protein phosphatase2A，PP2A)是真核生物體內(nèi)含量最豐富的一類絲氨酸/蘇氨酸型蛋白磷酸酶，具有重要的調(diào)節(jié)功能。參與細(xì)胞的代謝、DNA的復(fù)制、基因的轉(zhuǎn)錄

2、、RNA的剪接、蛋白質(zhì)的翻譯以及翻譯后修飾、細(xì)胞周期調(diào)控、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、細(xì)胞分化及細(xì)胞凋亡，同時(shí)PP2A與神經(jīng)退行性疾病、腫瘤、癌癥等多種疾病的發(fā)生發(fā)展密切有關(guān)。
　　 蛋白磷酸酶2A在細(xì)胞內(nèi)主要以核心酶和全酶兩種形式存在。其中蛋白磷酸酶2A的全酶是由一個(gè)結(jié)構(gòu)亞基(A)、一個(gè)催化亞基(C)和一個(gè)可變的調(diào)節(jié)亞基(B)構(gòu)成的異源三聚體。在這3個(gè)亞基中結(jié)構(gòu)亞基A存在兩個(gè)異構(gòu)體:Aα和Aβ。Aα和Aβ的結(jié)構(gòu)十分的相似具有86％的同源性，其中

3、Aα異構(gòu)體中含有590個(gè)氨基酸， Aβ異構(gòu)體含有602個(gè)氨基酸。但是PP2A-A亞基的這兩個(gè)異構(gòu)體在細(xì)胞中的含量具有很大的差異，Aα異構(gòu)體的含量明顯高于Aβ異構(gòu)體。
　　 本實(shí)驗(yàn)室之前的研究結(jié)果已經(jīng)證明了在人類前列腺癌細(xì)胞DU145和LNCaP的兩種細(xì)胞系中CREB是調(diào)控PP2A-Aα的重要轉(zhuǎn)錄因子，但其在H1299肺癌細(xì)胞中是否也具有相同的調(diào)控機(jī)制以及PP2A-Aα對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和凋亡影響并不清楚。在本實(shí)驗(yàn)中我們以H1299肺癌細(xì)

4、胞系為實(shí)驗(yàn)材料，運(yùn)用脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染的方法，建立了過表達(dá)PP2A-Aα和CREB的穩(wěn)定細(xì)胞系。對(duì)H1299-pCI-neo、H1299-pCI-PP2A-Aα、H1299-pCI-Creb三種穩(wěn)定細(xì)胞株做細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期相關(guān)蛋白的檢測(cè)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:相對(duì)于H1299細(xì)胞，過表達(dá)PP2A-Aα和過表達(dá)CREB增加細(xì)胞凋亡的敏感性，同時(shí)，過表達(dá)PP2A-Aα和過表達(dá)CREB的細(xì)胞其生長(zhǎng)都受到阻礙;且過表達(dá)PP2A-Aα對(duì)肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)