姜黃素誘導(dǎo)的K562細(xì)胞死亡中自噬的作用及其與凋亡的關(guān)系.pdf

1、目的：研究自噬在Curcumin誘導(dǎo)的K562細(xì)胞死亡中的作用機制及其與凋亡的相互關(guān)系。 方法：用不同濃度的姜黃素處理人慢性粒細(xì)胞血病細(xì)胞株K562細(xì)胞，采用MTT法測定姜黃素對K562細(xì)胞增殖的抑制作用；應(yīng)用MDC熒光染色、Hochest和AOEB染色觀察給藥后自噬和凋亡的發(fā)生；檢測LDH漏出率以觀察用自噬特異性抑制劑3-MA后姜黃素抑瘤作用的變化；免疫組化、流式細(xì)胞儀觀察自噬在姜黃素誘導(dǎo)的K562細(xì)胞死亡中的分子機制及自噬與

2、凋亡的關(guān)系。 結(jié)果：姜黃素可顯著抑制K562生長，誘導(dǎo)自噬及凋亡發(fā)生；且此作用呈明顯的時間、劑量依賴性；MDC熒光染色顯示姜黃素給藥后3h可誘導(dǎo)K562細(xì)胞發(fā)生自噬；Hochest和AOEB染色熒光染色顯示姜黃素給藥后48、72h可誘導(dǎo)K562細(xì)胞發(fā)生顯著的凋亡和壞死。LDH漏出率實驗結(jié)果表明，在姜黃素給藥前阻斷自噬，姜黃素對K562細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用增強，而在其給藥后阻斷自噬則姜黃素對K562細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用有所減弱；姜黃素

3、誘導(dǎo)K562細(xì)胞發(fā)生自噬時，自噬特異性蛋白LC3被激活；姜黃素誘導(dǎo)的K562細(xì)胞死亡與細(xì)胞線粒體膜電位的下降有關(guān)。 結(jié)論：姜黃素能明顯抑制K562細(xì)胞的生長，并誘導(dǎo)其發(fā)生自噬和凋亡。在姜黃素給藥前期，自噬對細(xì)胞有保護(hù)作用，可作為一種防御機制抵御環(huán)境變化對細(xì)胞造成的損傷，隔離某些凋亡因子，延遲凋亡的發(fā)生；而在姜黃素給藥后期，自噬則作為一種細(xì)胞的死亡程序，促進(jìn)凋亡的發(fā)生，凋亡是姜黃素誘導(dǎo)K562細(xì)胞死亡的主要原因。線粒體介導(dǎo)了死亡信