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1、目的:觀察氯離子通道阻斷劑 NPPB對(duì)順鉑(DDP)誘導(dǎo)的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞損傷的影響。
方法:應(yīng)用四氮唑(MTT)比色法檢測(cè)NPPB對(duì)順鉑誘導(dǎo)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的活性;用RT-PCR法測(cè)C6細(xì)胞和U251細(xì)胞Bcl-2、Bax、ClC-3的mRNA的表達(dá);用Western Blotting法測(cè)定C6細(xì)胞和U251細(xì)胞Bcl-2、Bax、ClC-3、Cyt-C蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:
1. MTT比色法結(jié)果顯示:與對(duì)照
2、組相比,NPPB組C6和U251細(xì)胞生存率無明顯變化;DDP組 C6和 U251細(xì)胞生存率明顯下降,為74.95%。而DDP+NPPB聯(lián)合組C6和U251細(xì)胞生存率與DDP組相比明顯增高。
2. RT-PCR結(jié)果表明:與對(duì)照組相比,NPPB組ClC-3、Bax、Bcl-2 mRNA表達(dá)無明顯變化;DDP組ClC-3、Bcl-2 mRNA表達(dá)降低,而Bax mRNA表達(dá)明顯增強(qiáng),Bax/Bcl-2比值增加。而DDP+NPPB聯(lián)合
3、組與DDP組相比ClC-3 mRNA表達(dá)增高,Bax/Bcl-2比值下降。
3.Western Blotting結(jié)果顯示:與對(duì)照組相比,NPPB組Bax、Bcl-2、Cyt-C蛋白表達(dá)無明顯變化;DDP組Bax/Bcl-2比值及Cyt-C蛋白表達(dá)明顯增高。而DDP+NPPB聯(lián)合組Bax/Bcl-2比值下降,Cyt-C蛋白表達(dá)明顯降低。
結(jié)論:
1. DDP明顯降低ClC-3表達(dá),同時(shí)增加Bax/Bcl-2比
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