光誘導(dǎo)表達載體的構(gòu)建及其在鹽藻除草劑抗性轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該實驗室實踐證明,對鹽藻使用除草劑草丁膦篩選體系,效果明顯.為對鹽藻進行轉(zhuǎn)基因研究,我們設(shè)計并克隆了一種光誘導(dǎo)的鹽藻表達載體,用于鹽藻的瞬時轉(zhuǎn)化和穩(wěn)定轉(zhuǎn)化.在該載體中我們將外源的bar基因插入到Dunaliella bardawil的CBR基因的啟動子(強光誘導(dǎo)表達)之下,并在bar基因下游接上CBR基因的終止子(3'-UTR,3'-untranslated region),構(gòu)成一個bar基因的表達盒.作者在鹽藻的培養(yǎng)等生物學(xué)特性的研究

2、基礎(chǔ)上,建立了兩種鹽藻轉(zhuǎn)化方法,即電激轉(zhuǎn)染和磷酸鈣共沉淀轉(zhuǎn)染.利用自己構(gòu)建的鹽藻光誘導(dǎo)載體,分別通過電激轉(zhuǎn)染和磷酸鈣共沉淀轉(zhuǎn)染,進行鹽藻的除草劑抗性轉(zhuǎn)化,從細胞生物學(xué)和分子生物學(xué)的角度對兩種轉(zhuǎn)化方法進行了比較和分析,為轉(zhuǎn)基因鹽藻生物反應(yīng)器研究初步建立了兩種比較穩(wěn)定的轉(zhuǎn)化方法.該研究論文分兩部分,第一部分闡述鹽藻光誘導(dǎo)表達載體pPB3R2a的分子克隆過程;第二部分闡述對鹽藻基本生物學(xué)特性的研究和用載體pPB3R2a轉(zhuǎn)化野生鹽藻Dunali

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