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文檔簡介
1、目的:Survivin是凋亡抑制蛋白(inhibitor of apoptosis protein,IAP)家族成員之一,常在肝癌細胞中呈現(xiàn)高表達,但其在肝癌進展的作用尚未完全闡明.該實驗通過以全反式維甲酸(all-trans retinoic acid,ATRA)誘導肝癌細胞凋亡并抑制細胞增殖,觀察survivin基因及其產(chǎn)物表達的變化,探討ATRA在肝癌治療中的作用和survivin在肝癌發(fā)展過程中所起到的影響,進一步證實以surv
2、ivin作為治療靶點的合理性.方法:用MTT法篩選出ATRA不同作用濃度后,分別以含50μmol/l和10μmol/lATRA的1640培養(yǎng)液孵育人肝癌細胞SMMC-7721,孵育6天后,計數(shù)活細胞,觀察ATRA對肝癌細胞增殖的抑制情況;通過倒置顯微鏡、微分干涉和電鏡聯(lián)合判斷細胞形態(tài)變化;流式細胞儀檢測不同濃度ATRA作用6天后細胞凋亡和細胞周期的變化;RT-PCR方法測定survivin mRNA在ATRA作用前后和不同作用濃度下的變
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