EGFR信號通路在黑色素瘤中調(diào)節(jié)紫杉醇耐藥和侵襲轉(zhuǎn)移機制探討.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、 本文用紫杉醇和/或EGFR抑制劑AG1478、ERK抑制劑PD98059、PI3K抑制劑LY290042分別作用黑色素瘤A375細胞，探討表皮生長因子受體(EGFR)信號通路與紫杉醇耐藥的關(guān)系及其作用機制；用EGF和/或EGFR抑制劑AG1478作用A375細胞，探討EGFR信號通路調(diào)節(jié)黑色素瘤侵襲與轉(zhuǎn)移的分子機制。 方法：首先篩選出EGFR高表達A375細胞株，取對數(shù)生長期細胞進行實驗。觀察細胞凋亡情況。分析細胞周期(

2、PI染色)和凋亡率情況。然后應(yīng)用Matrigel膠和MTT法進行體外黏附實驗。用Matrigel膠和Boyden小室進行體外侵襲實驗。最后用Western blot方法檢測P-EGFR，P-ERK，P-AKT，Bcl-2，Bax，Caspase-3蛋白表達。用半定量RT-PCR檢測MMP-2，MMP-9，TIMP-1，TIMP-2mRNA表達。 研究表明：1.紫杉醇以時間和劑量依賴方式抑制黑色素瘤生長和誘導(dǎo)細胞凋亡。通過激活黑色

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