浙江沿海創(chuàng)傷弧菌的分布特征及其種群結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、創(chuàng)傷弧菌(Vibrio vulnificus)是一種存在于海產(chǎn)品中的革蘭氏陰性嗜鹽性細(xì)菌，如蝦、魚(yú)、牡蠣和蛤蜊等，同時(shí)也廣泛分布于全球河口、海洋和沿海環(huán)境中。該菌于1976年在美國(guó)首次確認(rèn)，是美國(guó)因食用海產(chǎn)品而致死病例的首要病因，每年有40多個(gè)報(bào)告的死亡病例。世界范圍內(nèi)許多沿海國(guó)家都報(bào)道了因創(chuàng)傷弧菌感染而導(dǎo)致急性腸胃炎、原發(fā)性敗血癥，或經(jīng)傷口感染引起的蜂窩組織炎等，嚴(yán)重的需要截肢甚至死亡。浙江省是我國(guó)該類病例報(bào)道最早，發(fā)生最多的地區(qū)。創(chuàng)

2、傷弧菌引起的感染事件多發(fā)生于氣溫較高的月份里，一般認(rèn)為是因食用或處理污染了創(chuàng)傷弧菌的海產(chǎn)品而引起的。浙江沿海盛產(chǎn)各類海產(chǎn)品，且當(dāng)?shù)鼐用袼赜猩郴虬肷澈．a(chǎn)品的習(xí)慣，該機(jī)會(huì)致病菌對(duì)于患有肝炎、肝硬化、高血壓、免疫抑制等免疫力低下或缺陷的人群具有潛在的公共健康威脅。
　　本研究通過(guò)對(duì)市售海水產(chǎn)品中創(chuàng)傷弧菌的污染情況的監(jiān)測(cè)，對(duì)創(chuàng)傷弧菌感染臨床分離株的檢測(cè)及其分子特征的分析，研究不同來(lái)源創(chuàng)傷弧菌的毒力特征及其分子遺傳關(guān)系，解析浙江地區(qū)創(chuàng)傷

3、弧菌的污染情況，為食品安全風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估以及監(jiān)測(cè)預(yù)警和分子溯源提供了數(shù)據(jù)。獲得的主要研究結(jié)果如下:
　　(1)通過(guò)對(duì)舟山、杭州等市售海產(chǎn)品中創(chuàng)傷弧菌的污染情況監(jiān)測(cè)，發(fā)現(xiàn)創(chuàng)傷弧菌的污染情況比較嚴(yán)重，在夏季海產(chǎn)品中創(chuàng)傷弧菌的陽(yáng)性檢出率和污染濃度是最高的，其中毛蚶、蝦和牡蠣中的陽(yáng)性率較高。分離的菌株存在遺傳多樣性，分離到了生物Ⅰ型和生物2型的菌株。其基因型分布廣泛，vcgC-16S rRNA B型是主要型別，提示具有致病潛力。藥敏結(jié)果顯示分離

4、菌株對(duì)多數(shù)抗生素均敏感，但對(duì)氨基糖苷類和頭孢類部分抗生素顯示出耐藥性。
　　(2)通過(guò)對(duì)食源性疾病病例的監(jiān)測(cè)開(kāi)展創(chuàng)傷弧菌的篩查，檢出3株胃腸道感染的創(chuàng)傷弧菌，均為生物1型和vcg C-16S rRNAB基因型，藥敏結(jié)果顯示均對(duì)妥布霉素具有耐藥性。同時(shí)監(jiān)測(cè)發(fā)現(xiàn)存在創(chuàng)傷弧菌與副溶血性弧菌共同感染的情況。
　　(3)從傷口感染創(chuàng)傷弧菌的一病例中分離出一株新MLST型菌株，命名為ST136型，為生物1型和vcg C-16S rRNA

5、B基因型，藥敏結(jié)果顯示其對(duì)頭孢唑啉和頭孢替坦中度耐性。
　　(4)通過(guò)MLVA、MLST和PFGE等不同分子分型方法對(duì)不同來(lái)源的創(chuàng)傷弧菌開(kāi)展了分子分型比對(duì)分析，結(jié)果表明各種分子分型方法間各有優(yōu)劣。PFGE是分子分型的金標(biāo)準(zhǔn)，但創(chuàng)傷弧菌試驗(yàn)中存在DNA降解的情況。在NotⅠ酶切條件下Simpson分辨指數(shù)D值為1，在SfiⅠ酶切條件下D值為0.998。同時(shí)結(jié)果表明PFGE優(yōu)先采用SfiⅠ酶切方法，NotⅠ作為備選酶切選項(xiàng)，同時(shí)結(jié)合分

6、離菌株的相關(guān)流行病學(xué)信息，可作為研究創(chuàng)傷弧菌感染和傳播途徑有力工具。MLVA分子分型的D值為0.994，顯示出良好的分型效果，可用于流行性病學(xué)的調(diào)查和溯源分析。MLST分型的D值為0.983，可用于創(chuàng)傷弧菌種群結(jié)構(gòu)和遺傳關(guān)系的研究。
　　(5)通過(guò)對(duì)我國(guó)北京、上海、廣東、浙江和福建等地區(qū)蝦中分離和臨床分離的61株創(chuàng)傷弧菌開(kāi)展MLST分析，獲得了46個(gè)新ST型，顯示出豐富的遺傳多樣性，同時(shí)也解析了其種群結(jié)構(gòu)、系統(tǒng)發(fā)生和菌株間的遺傳關(guān)