MA-GM-CSF免疫脂質體在白血病小鼠體內的組織分布.pdf

1、目的：制備MA-GM-CSF免疫脂質體，觀察其對白血病HL-60細胞的作用；制備<'131>I-MA-GM-CSF免疫脂質體(<'131>I作為示蹤劑)，觀測其在人急性髓性白血病模型SCID小鼠體內的分布，證明GM-CSF藥物脂質體組織分布特異性，為探索臨床治療急性髓性白血病的新方法提供實驗依據(jù)。 方法：用逆相蒸發(fā)法制 <'31>I-MA脂質體，測定藥物包封率及<'31>I標記率，再以戊二醛交聯(lián)法偶聯(lián)GM-CSF和<'31>I-

2、MA脂質體，測定GM-CSF的偶聯(lián)率；通過MTT法測定MA．GM-CSF免疫脂質體對白血病HL-60細胞的殺傷作用；異種移植白血病HL-60細胞的SCID小鼠-人白血病模型建立后，采用骨髓涂片鏡檢、流式細胞分析、病理學及染色體檢查進行鑒定；發(fā)病小鼠分兩組，分別由尾靜脈注射 <'31>I-MA脂質體和GM-CSF的混合液及 <'31>I-MA-GM-CSF免疫脂質體，正常小鼠一組，由尾靜脈注射 <'31>I-MA-GM-CSF免疫脂質體，

3、觀察 <'31>I-MA-GM-CSF免疫脂質體在小鼠體內的生物學分布。 結果：1.MTZ包封率為80.1％，Ara-C包封率為84.2％，<'31>I標記率為86.6％，GM-CSF偶聯(lián)率為54.0％。2.MA-GM-CSF免疫脂質體、MA脂質體和MA．溶液對HL-60細胞均有細胞毒作用，而且其殺傷作用隨藥物劑量的增加而增強，其中MA-GM-CSF免疫脂質體的細胞毒作用顯著強于MA脂質體和MA溶液(p<0.05)，而MA脂質體

4、的細胞毒作用顯著強于MA溶液(p<0.05)。3.尾靜脈接種的HL-60細胞在SCID小鼠體內可以植活，4～5周后發(fā)生白血病。4.<'31>I-MA-GM-CSF免疫脂質體主要分布于白血病小鼠的脾臟和骨髓組織中。在脾臟和骨髓中，注入<'31>I-MA-GM-CSF免疫脂質體30min后出現(xiàn)攝取峰，其組織攝取率(％IDmg)明顯高于對照組和正常組(p<0.05)，且滯留24h后高于其他臟器。此外，<'31>I-MA-GM-CSF免疫脂質體

5、在肝臟和肺臟中的分布高于對照組和正常組(p<0.05)，而在腎臟中的分布與兩組相比無顯著性(p>0.05)。在血液中，<'31>I-MA-GM-CSF免疫脂質體濃度在注入5min后最高，但明顯低于對照組和正常組(p<0.05)。 結論：1.逆相蒸發(fā)法制 MA-GM-CSF免疫脂質體條件易控制，重復性好，可獲得較高包封率和偶聯(lián)率的脂質體。2.MA-GM-CSF免疫脂質體具有體外抗白血病作用，對HL-60細胞具有明顯的細胞毒作用；M