玻璃體內注射用微球的制備.pdf

1、微球制劑是一種用適宜高分子材料為載體包裹或吸附藥物而制成的球形或類球形的微粒。其直徑一般在微米數量級，直徑小于500nm者稱為納米粒[1]。藥物制成微球后具有緩釋長效和靶向作用等優(yōu)點。它在體內通過擴散、材料的溶解和材料的降解三種方式釋放藥物。 眼部給藥是眼科用藥的重要途徑之一，但由于角膜屏障的存在，淚液的稀釋作用和淚道的引流等原因，許多眼用制劑的生物利用度較差，在治療應用時受到了限制，尤其是治療眼后段疾病。為了在玻璃體內獲得并維

2、持較高的藥物濃度，必須采用反復玻璃體腔內注射給藥。這樣增加了患者的痛苦，進一步增加了手術操作的困難和產生并發(fā)癥的危險。另一方面，藥物可經鼻腔、口腔等途徑吸收，毒副作用增強。因此，近年來許多眼科研究者正在探索眼部新的載藥系統(tǒng)，以求較長時間地維持藥物濃度，減少系統(tǒng)性吸收，減少并發(fā)癥，達到治療目的。生物降解性微球，具有制備較簡單，穩(wěn)定性較好，成本較低等優(yōu)點，微球制劑可混懸在介質中用作滴眼劑或眼內注射劑，減少眼內不適感，微球制劑還可提高藥物的靶

3、向作用。因此，微球眼用給藥系統(tǒng)逐漸得到更多的肯定。 本研究以生物可降解乙交酯和丙交酯的無規(guī)共聚物(PLGA)為載體材料，采用W/O型乳化-溶劑揮發(fā)方法，以地塞米松為模型藥物制備微球；采用正交實驗法研究影響微球制備的工藝條件，考察了微球的粒徑大小與分布，建立HPLC測定微球中地塞米松的方法，測定微球的載藥量和包封率，評價載藥微球的體外釋放行為。研究結果表明，影響微球包封率和微球大小的因素次序為：外水相PVA濃度(﹪，w/v)＞有機

4、相PLGA濃度(﹪，w/v)＞投藥比[=投藥量/(投藥量+PLGA投藥量)]，制備地塞米松微球的優(yōu)化處方為：外水相為2﹪PVA水溶液，有機相為7.5﹪PLGA濃度，20﹪的投藥比。通過W/O型乳化-溶劑揮發(fā)法可以簡便、快速制備得到地塞米松微球，微球形態(tài)完整，表面光滑，微球的粒徑范圍為4.70μm±1.6μm，載藥量為15.49﹪±0.31﹪，包封率為78.64﹪±2.23﹪。體外釋藥10d累積釋放量約90﹪。對累積釋放曲線分別進行零級(

5、Q=kt)，一級(Q=100-100ekt)，Higuchi(Q=kt1/2)，Ritger-Peppas(Q=ktm)，擴散-松弛(Q=k1t1/2+t)，Hixson-Crowell(Q=kit+k2t2+k3t3)及擴散-溶蝕(Q=k1t1/2+k2t+k3t2+k4t3)模型擬合，地塞米松微球釋放曲線的擬合方程為Q=43.9370t1/2+0.7817t-036849t2+0.0206t3，R2=0.998,符合擴散-溶蝕釋藥模

6、型。 同樣以PLGA為載體材料，采用O/O型溶劑揮發(fā)法制備5-氟尿嘧啶脫氧核苷PLGA微球(FUR-PLGA-MS)，光學顯微鏡下觀察微球形態(tài)，紫外分光光度法法測定微球的載藥量、包封率及累積釋藥量。實驗結果為制備的微球球形圓整，分散性好。微球平均粒徑為8.52μm,載藥量為7.66﹪±0.06﹪，包封率為75.96﹪±0.80﹪，體外釋放較快，1小時即釋放了60﹪。從釋放結果可以推測，FUR-PLGA-MS是混合骨架結構，部分藥

7、物可能以分子或細小粒子形式吸附在微球表面。 為研究地塞米松PLGA微球對增殖性玻璃體視網膜病變(PVR)的治療效果，建立了PVR動物模型，經兔眼角膜緣后2-3mm鞏膜處，用30號針頭將同源性兔成纖維細胞注入兔眼玻璃體腔中，造成實驗性PVR動物模型。首先進行了安全性檢查，通過分別向兔玻璃體腔內注射0.1ml空白微球(10mg)混懸液和0.1ml地塞米松PLGA微球(10mg)混懸液，4周后間接眼底鏡觀察PVR動物兔眼眼底兩組均未見

8、異常。在4周后靜脈注氣處死動物，光學顯微鏡組織學檢查表明兩組也均未見異常。然后進行藥效學實驗，將12只實驗動物隨機分成4組，4只為空白微球陰性對照組，4只為地塞米松陽性對照組，4只為地塞米松PLGA微球組。在注射同源性兔成纖維細胞后，立即注入各組藥物混懸液0.1ml。在1、4、7、14、28d用裂隙燈顯微鏡和間接眼底鏡觀察PVR動物兔眼眼底，(按Fastenberg的眼底改變分級方法)。實驗結果證實，地塞米松能明顯抑制玻璃體視網膜增生程

9、度，第28d時空白微球對照組平均增生程度為3.8，視網膜脫離的發(fā)生率為87.5﹪，地塞米松陽性對照組為3.0，視網膜脫離的發(fā)生率為62.5﹪，地塞米松微球組為1.9，視網膜脫離的發(fā)生率為25.0﹪。顯示微球組延遲了PVR的發(fā)生，視網膜脫離發(fā)生率明顯減少，且微球組和陽性對照組相比有顯著性差別(P＜0.05)，微球組和空白對照組比較有顯著差異(P＜0.01)，而空白微球對照組和陽性對照組相比沒有顯著性差別(P＞0.05)。說明地塞米松陽性對