ADFMChR對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞及移植瘤生長的影響.pdf

1、目的:研究5-烯丙基-7-二氟甲基白楊素(5-Allyl-7-Gen-difluoromethylenechrysin,ADFMChR)對(duì)體外培養(yǎng)肺腺癌(A549)細(xì)胞、中國倉鼠肺上皮(CHL)細(xì)胞增殖活性和細(xì)胞生長及對(duì)肺腺癌A549裸鼠移植瘤生長的影響。
　　方法:體外培養(yǎng)A549細(xì)胞和CHL細(xì)胞,MTT比色法測(cè)定細(xì)胞增殖活性;細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)細(xì)胞存活率,繪制細(xì)胞生長曲線。建立肺腺癌A549裸鼠移植瘤模型,測(cè)定荷人肺腺癌裸鼠的去瘤

2、體重、移植瘤大小和重量,經(jīng)HE染色光學(xué)顯微鏡下觀察移植瘤組織形態(tài)學(xué)特征,應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)移植瘤組織中PCNA、VEGF、CD31的表達(dá)。
　　結(jié)果:MTT比色法測(cè)定結(jié)果顯示:ADFMChR分別在終濃度為1.0,2.0,4.0,8.0,16.0μM時(shí),處理A549細(xì)胞48h,細(xì)胞增殖抑制率分別為24.39％、47.66%、62.75%、73.35%、85.94%,IC50值為2.63μM,其抑制率高于白楊素(IC50為17.4

3、8μM),而與DDP(IC50為2.71μM)相當(dāng),呈濃度依賴性。終濃度分別為1.0,2.0,4.0,8.0,16.0μM的ADFMChR處理中國倉鼠肺上皮CHL細(xì)胞48h,細(xì)胞增殖相對(duì)抑制率為3.95%、7.44%、13.89%、21.60%、27.43%,IC50值為44.89μM,其對(duì)CHL細(xì)胞的毒性作用與白楊素(IC50為45.03μM)相當(dāng),而低于DDP(IC50為5.50μM)。ADFMChR的選擇指數(shù)SI為17.07高于C

4、hR(SI為2.58)和DDP(SI為2.03)。
　　細(xì)胞計(jì)數(shù)法檢測(cè)結(jié)果表明:ADFMChR分別在終濃度為1.0,4.0,16.0μM處理 A549細(xì)胞48h,其細(xì)胞生長抑制率為16.01%、39.07%、73.36%,IC50值為5.83μM,其抑制率高于白楊素(IC50為18.93μM),而與5-FU(IC50為6.22μM)相當(dāng),呈濃度和時(shí)間依賴性。以終濃度分別為1.0,4.0,16.0μM的ADFMChR處理 CHL細(xì)胞

5、48h,其細(xì)胞生長抑制率為11.74%、22.65%、32.62%,IC50值為68.52μM,其對(duì)CHL細(xì)胞的毒性作用與白楊素(IC50為99.22μM)接近,而低于5-FU(IC50為16.50μM)。ADFMChR的選擇指數(shù)SI為11.75高于ChR(SI為5.24)和5-FU(SI為2.65)。
　　肺腺癌裸鼠移植瘤模型治療實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示:ADFMChR對(duì)肺腺癌移植瘤生長具有顯著抑制作用,用5.0、10.0、20.0mg/k

6、g體重的ADFMChR對(duì)移植瘤的瘤重抑制率分別為42.98%,82.31%和89.91%。
　　免疫組化檢測(cè)結(jié)果表明: ADFMChR具有抑制肺腺癌裸鼠移植瘤細(xì)胞 PCNA、VEGF蛋白及移植瘤間質(zhì)血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子CD31蛋白表達(dá)作用。
　　結(jié)論:1)ADFMChR對(duì)肺腺癌 A549細(xì)胞增殖和生長抑制作用強(qiáng),而對(duì)中國倉鼠肺上皮CHL細(xì)胞的抑制作用較弱,其抑制A549細(xì)胞增殖和生長作用具有相對(duì)選擇性。
　　2)ADF