Survivin反義肽核酸對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文Survivin反義肽核酸對(duì)肺腺癌A549細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究姓名：李學(xué)昌申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：外科學(xué)（胸心外）指導(dǎo)教師：閔家新20061101第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文序列(232—251bp)作為作用靶位，以人工合成并標(biāo)記熒光蛋白的反義肽序列(aPNA)抑制此靶區(qū)，用脂質(zhì)體共轉(zhuǎn)染法將其轉(zhuǎn)染肺腺癌A549細(xì)胞株，在倒置熒光顯微鏡下觀察轉(zhuǎn)染結(jié)果并進(jìn)行鑒定，觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，檢測(cè)不同時(shí)間和濃度下細(xì)胞增值特性，用MTT

2、法檢測(cè)細(xì)胞存活率，流式細(xì)胞分析術(shù)檢測(cè)各細(xì)胞周期的比例，并用MTT法檢測(cè)不同時(shí)段脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染aPNA組細(xì)胞與正常組細(xì)胞在加入一定濃度的順鉑下的生長(zhǎng)情況；在此基礎(chǔ)上，進(jìn)一步采用RTPCR、W色stemB10t、免疫組化等方法探討脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染SurvivinaPNA后肺腺癌A549細(xì)胞周期基因p21及Survivin基因的mRNA和蛋白的變化。一綜上所述，本研究得出以下結(jié)論：1NSCLC癌組織中Survivin呈高表達(dá)，與NSCLC患者的性別、病

3、理類型無關(guān)，與分化程度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移與否及TNM分期相關(guān)；NSCLC中Survivin、p16蛋白表達(dá)呈正相關(guān)，二者在肺癌的發(fā)生發(fā)展過程中起一定的作用。2SurvivinaPNA能成功轉(zhuǎn)染肺腺癌A549細(xì)胞，轉(zhuǎn)染后可有效的抑制肺癌細(xì)胞內(nèi)SurvivinmRNA和蛋白的表達(dá)，并可抑制P2l基因的表達(dá)，阻止腫瘤細(xì)胞經(jīng)過G。期進(jìn)入M期，抑制肺癌細(xì)胞的生長(zhǎng)，引發(fā)細(xì)胞凋亡。其抑制作用有時(shí)間依賴性和濃度依賴性。3SurvivinaPNA與順鉑聯(lián)合作用