慢性胰腺炎大鼠橫紋肌細(xì)胞IR、IRS-1、GLUT4的表達(dá)及羅格列酮的干預(yù)作用.pdf

1、第一部分油酸誘導(dǎo)大鼠慢性胰腺炎模型的建立及評(píng)價(jià)目的：建立可靠的油酸誘導(dǎo)大鼠慢性胰腺炎模型，觀察其病理及超微結(jié)構(gòu)改變規(guī)律，探討慢性胰腺炎組織形態(tài)學(xué)變化，為研究慢性胰腺炎發(fā)病機(jī)理及藥物防治奠定基礎(chǔ)。 方法：選用健康SD大鼠，隨機(jī)分為模型組和對(duì)照組。模型組大鼠在無(wú)菌條件下打開腹腔，經(jīng)腸壁逆行胰膽管插管，用注射泵以恒定的壓力和速度向膽胰管內(nèi)注射油酸的方法制作慢性胰腺炎模型。動(dòng)態(tài)觀察大鼠術(shù)后1h、24h、72h、1周、3周、6周的胰腺形

2、態(tài)改變。對(duì)照組大鼠經(jīng)插管灌注等量的生理鹽水。 結(jié)果：模型組大鼠胰腺病理顯示：24h后胰腺腺腔增寬，細(xì)胞空泡樣變形，胰腺實(shí)質(zhì)鄰近的小導(dǎo)管內(nèi)充滿注射的溶液1周后出現(xiàn)胰腺實(shí)質(zhì)變性，間質(zhì)水腫，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)；6周后表現(xiàn)為典型的腺體萎縮，不規(guī)則纖維化，脂肪替代；胰島游離，結(jié)構(gòu)松散。 結(jié)論：此種建立大鼠慢性胰腺炎模型的方法效果較為確切，并具有穩(wěn)定性好、可重復(fù)性高、成模時(shí)間快的特點(diǎn)。且此模型胰腺組織病理表現(xiàn)與人類慢性胰腺炎病理表現(xiàn)相似。

3、是研究慢性胰腺炎發(fā)病機(jī)理及觀察藥物治療作用的一種性能良好的實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ汀?第二部分慢性胰腺炎大鼠橫紋肌細(xì)胞IR、IRS-1的表達(dá)及羅格列酮的干預(yù)作用 目的：研究慢性胰腺炎對(duì)大鼠橫紋肌細(xì)胞胰島素受體(InsulinReceptor,IR)，胰島素受體底物-1(InsulinReceptorSubstrate-1，IRS-1)基因表達(dá)的影響，探討IR、IRS-1對(duì)葡萄糖代謝調(diào)節(jié)的可能作用機(jī)理及羅格列酮的干預(yù)作用。 方法：

4、制備油酸誘導(dǎo)的大鼠模型，成模后實(shí)驗(yàn)大鼠分為2組：模型組，給藥組。給藥組羅格列酮溶液灌胃6周。治療結(jié)束處死實(shí)驗(yàn)大鼠，留取橫紋肌組織標(biāo)本，RT-PCR法檢測(cè)各組橫紋肌細(xì)胞IR、IRS-1mRNA表達(dá)量并使用免疫組化方法檢測(cè)各組橫紋肌細(xì)胞IR、IRS-1的表達(dá)。 結(jié)果：1.慢性胰腺炎大鼠橫紋肌細(xì)胞IR、IRS-1表達(dá)明顯降低(P＜0.05)；2.使用羅格列酮治療6周后IR、IRS-1的表達(dá)較模型組明顯升高(P＜0.05)。 結(jié)

5、論：慢性胰腺炎可導(dǎo)致IR、IRS-1降低，表明慢性胰腺炎可于轉(zhuǎn)錄水平阻礙IR、IRS-1的基因表達(dá)，這可能是慢性胰腺炎時(shí)IR、IRS-1影響肌肉葡萄糖代謝機(jī)制之一，羅格列酮可提高IR、IRS-1的表達(dá)。 第三部分慢性胰腺炎大鼠橫紋肌細(xì)胞GLUT4的表達(dá)及羅格列酮的干預(yù)作用 目的：研究慢性胰腺炎對(duì)大鼠橫紋肌細(xì)胞葡萄糖載體4(GlucoseTransporter-4，GLUT4)基因表達(dá)的影響，探討GLUT4對(duì)葡萄糖代謝

6、調(diào)節(jié)的可能作用機(jī)理及羅格列酮的干預(yù)作用。 方法：制備油酸誘導(dǎo)的胰腺炎大鼠模型，成模后實(shí)驗(yàn)大鼠分為2組：模型組，給藥組。給藥組用羅格列酮溶液灌胃6周。治療結(jié)束處死大鼠，留取橫紋肌組織標(biāo)本，RT-PCR法檢測(cè)各組橫紋肌細(xì)胞GLUT4mRNA表達(dá)量，并使用免疫組化方法檢測(cè)各組橫紋肌細(xì)胞GLUT4的表達(dá)。 結(jié)果：1.慢性胰腺炎大鼠橫紋肌細(xì)胞GLUT4表達(dá)明顯降低(P＜0.05)：2.使用羅格列酮治療6周后GLUT4的表達(dá)較模