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文檔簡介
1、目的:
研究缺血性腦卒中不同亞型患者血漿中miRNAs(microRNA)表達(dá)譜的差異。
方法:
1.選取2012年11—12月于青島大學(xué)附屬醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科就診的首次發(fā)病的16例患者,按TOAST分型將其分為大動脈粥樣硬化性(large artery atherosclerotic,LAA)卒中組8例,小動脈閉塞性(small artery occlusion,SAO)卒中組8例,以及同期健康體檢者8名作為對
2、照組,應(yīng)用高通量測序法檢測各組血漿中miRNAs的表達(dá)譜,篩選出差異表達(dá)的miRNAs。
2.采用實(shí)時熒光定量PCR法對其中的miR-146b-5p、miR-23a-3p、miR-451a進(jìn)行驗(yàn)證。
3.對篩選出的差異表達(dá)的miRNAs進(jìn)行靶基因預(yù)測及生物信息學(xué)分析。
結(jié)果:
1. LAA組、SAO組及對照組血漿中分別檢測到369個miRNAs成熟體。通過miRNAs差異分析,發(fā)現(xiàn)let-7a-5
3、p、miR-744-5p等12個miRNAs在3組中均呈現(xiàn)差異性表達(dá)(表達(dá)差異均大于2倍,P<0.01);與對照組比較,miR-126-5p、miR-23a-3p、miR-143-3p等34個miRNAs在LAA組表達(dá)顯著下調(diào)(表達(dá)差異均大于2倍,P<0.01);在SAO組中miR-1304-3p、miR-451a較對照組表達(dá)顯著下調(diào)(表達(dá)差異均大于2倍,P<0.01),而miR-320a、miR-320b、miR-99b-5p等27個
4、miRNAs較對照組表達(dá)則顯著上調(diào)(表達(dá)差異均大于2倍,P<0.01)。
2.實(shí)時熒光定量PCR對其中的miR-146b-5p、miR-23a-3p、miR-451a的驗(yàn)證結(jié)果與高通量檢測結(jié)果一致。
3.生物信息學(xué)分析表明,差異表達(dá)的miRNAs調(diào)控的靶基因主要與細(xì)胞增殖、黏附、代謝等生物學(xué)功能相關(guān)。
結(jié)論:
LAA型卒中患者及SAO型卒中患者血漿miRNAs表達(dá)譜存在明顯差異,提示miRNAs可
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