淫羊藿黃酮對被動吸煙誘導(dǎo)骨吸收的防治及其作用機理的實驗研究.pdf_第1頁
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1、第一章淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨量、骨生物力學(xué)、骨形態(tài)學(xué)與骨代謝生化指標(biāo)的影響 第一部分淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨量的影響 目的:探討淫羊藿黃酮干預(yù)對被動吸煙大鼠骨量的影響。 方法:分組:選用2月齡Sprague-Dawley(SD)大鼠60只,隨機分為6組,每組10只,各組雌雄各半,雌雄分籠飼養(yǎng)。A組:空白對照組,常規(guī)方法飼養(yǎng),不給予被動吸煙;B組:被動吸煙組,不給予灌服藥物;C組:被動吸煙+鈣組,灌服高效鈣(

2、75mg.kg<'-1>·d<'-1>)+維生素D<,3> 21 IU kg<'-1>d<'-1>;D組:被動吸煙+低劑量,灌服淫羊藿黃酮(75mg·kg<'-1>·d<'-1>);E組:被動吸煙+中劑量,灌服淫羊藿黃酮(150mg·kg<'-1>·d<'-1>);F組:被動吸煙+高劑量,灌服淫羊藿黃酮(300mg·kg<'-1>·d<'-1>)。按“密室熏煙法"給予實驗組(B組、C組、D組、E組、F組、)大鼠被動吸煙4個月。實驗第4月

3、末處死大鼠,取出大鼠雙側(cè)脛骨、雙側(cè)股骨、雙側(cè)肱骨和全部腰椎,測定雙側(cè)股骨、雙側(cè)脛骨、雙側(cè)肱骨和全部腰椎骨密度。 結(jié)論:淫羊藿黃酮可有效防治被動吸煙誘導(dǎo)的大鼠骨密度值的降低,使大鼠骨密度維持于較高水平。 第二部分淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨生物力學(xué)的影響 目的:探討淫羊藿黃酮干預(yù)對被動吸煙大鼠骨生物力學(xué)性能的影響。 方法:實驗動物干預(yù)完畢后測定:(1)第四腰椎體力學(xué)性能指標(biāo)中彈性模量、最大載荷、最大應(yīng)力、變形

4、位能、結(jié)構(gòu)剛度;(2)股骨結(jié)構(gòu)力學(xué)性能指標(biāo)中最大載荷、破壞載荷、變形位能、結(jié)構(gòu)剛度;(3)股骨材料力學(xué)性能指標(biāo)中彈性模量、最大應(yīng)力、最大應(yīng)變、破壞應(yīng)力、破壞應(yīng)變。 結(jié)論:淫羊藿黃酮可有效防治被動吸煙誘導(dǎo)的大鼠骨生物力學(xué)性能的降低,使其維持于較高水平。 第三部分淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨形態(tài)學(xué)的影響 目的:探討淫羊藿黃酮干預(yù)對被動吸煙大鼠骨形態(tài)學(xué)的影響。 方法:實驗動物在處死前14、13d和4、3d分別皮下

5、注射四環(huán)素和鈣黃綠素作體內(nèi)熒光標(biāo)記,干預(yù)完畢后測定或觀察:(1)脛骨上段松質(zhì)骨骨形態(tài)計量學(xué)靜態(tài)指標(biāo)中骨小梁面積百分?jǐn)?shù)、骨小梁厚度、骨小梁數(shù)目、骨小梁分離度;(2)脛骨上段松質(zhì)骨成骨細(xì)胞、破骨細(xì)胞計數(shù);(3)股骨頭掃描電鏡形態(tài)分析指標(biāo)中骨小梁拱橋結(jié)構(gòu)、骨表面形態(tài)、骨小梁平均直徑、骨面積百分比。 結(jié)論:淫羊藿黃酮可有效防治被動吸煙誘導(dǎo)的大鼠骨形態(tài)學(xué)性能的降低,使其維持于較高水平。 第四部分 淫羊藿黃酮對被動

6、吸煙大鼠骨代謝生化指標(biāo)的影響 目的:探討淫羊藿黃酮干預(yù)對被動吸煙大鼠骨代謝生化指標(biāo)的影響。 方法:每周測定大鼠體重;在實驗第8周時用代謝籠收集24小時尿液,斷尾尾靜脈放血。實驗第4月末,處死大鼠前一天用代謝籠收集24小時尿液,處死大鼠后心腔內(nèi)抽血,測定: (1)體重隨時間增長情況;(2)臟/體比值指標(biāo)中肝、脾、腎、子宮、卵巢重量;(3)股骨骨鈣含量、骨磷含量、骨礦物質(zhì)含量;(4)血清骨鈣素和抗酒石酸酸性磷酸酶及尿脫氧吡

7、啶啉:(5)在第8周時血Ca、血P、血ALP、尿Ca、尿P、尿Hop;(6)在第4月末時血Ca、血P、血ALP、尿Ca、尿P、尿Hop。 結(jié)論:淫羊藿黃酮可有效防治被動吸煙誘導(dǎo)的大鼠骨代謝生化指標(biāo)的惡化,使其維持于較正常的水平。 第二章淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨組織腫瘤壞死因子和白介素1表達(dá)的影響及其相關(guān)性 目的:探討淫羊藿黃酮防治被動吸煙大鼠骨質(zhì)疏松的可能分子機理。 方法:實驗動物干預(yù)完畢后取出脛骨,制

8、備標(biāo)本,RT-PCR法檢測RNFmRNA和IL-1mRNA表達(dá),并應(yīng)用曲線擬合分析其相關(guān)性。 結(jié)論:淫羊藿黃酮可抑制被動吸煙大鼠骨組織TNF和IL-1 mRNA的表達(dá),可能是其防治骨質(zhì)疏松的分子機理之一。 第三章淫羊藿黃酮對被動吸煙大鼠骨組織骨橋蛋白表達(dá)的影響 目的:進(jìn)一步探討淫羊藿黃酮防治被動吸煙大鼠骨質(zhì)疏松的可能分子機理。 方法:實驗動物干預(yù)完畢后取出脛骨,制備標(biāo)本,RT-PCR法檢測OPN mRNA

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