環(huán)境響應(yīng)型納米凝固膠用作藥物載體的研究.pdf

1、納米凝膠因其良好的生物相容性、穩(wěn)定的納米尺寸和內(nèi)部結(jié)構(gòu)等特性，在藥物載體領(lǐng)域具備諸多優(yōu)勢：（1）可有效防止所負(fù)載蛋白藥物的凝集變性；（2）可長時(shí)間持續(xù)釋放藥物；（3）使用方便，一般給藥途徑是注射給藥或口服給藥；（4）可有效防止藥物泄露，提高藥物療效，減少毒副作用等。但是，目前納米凝膠在智能化給藥方面尚存在不足。環(huán)境響應(yīng)型納米凝膠因?yàn)榭赏ㄟ^響應(yīng)葡萄糖、氧化還原、溫度、pH等外界環(huán)境的微小變化而產(chǎn)生自身可逆性體積變化或溶膠—凝膠變化，最終可

2、實(shí)現(xiàn)藥物定點(diǎn)、定時(shí)、定量釋放。與傳統(tǒng)響應(yīng)型水凝膠相比，納米凝膠對環(huán)境變化更加敏感，具有更快的響應(yīng)速率。本論文針對腫瘤細(xì)胞中還原性谷胱甘肽高表達(dá)和糖尿病患者血糖濃度高的微環(huán)境，設(shè)計(jì)制備了兩種環(huán)境響應(yīng)型納米凝膠——氧化還原響應(yīng)納米凝膠和葡萄糖敏感納米凝膠，并將其用于藥物傳遞領(lǐng)域研究，以期實(shí)現(xiàn)藥物的控制釋放，提高治療效果。
　　一、氧化還原響應(yīng)納米凝膠藥物載體
　　本體系以乙腈為溶劑、甲基丙烯酸（MAA）為單體、偶氮二異丁腈（AI

3、BN）為引發(fā)劑，通過引入帶有二硫鍵的交聯(lián)劑雙丙烯酰胱胺（BACy），采用沉淀聚合方法制備出具有氧化還原響應(yīng)的PMAA納米凝膠，并將其用于鹽酸阿霉素（DOX）的遞送研究。利用掃描電鏡、傅里葉紅外變換光譜儀對所制備微球的形貌、粒徑及結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)得到了粒徑均一的微球，雙硫鍵被成功引入到納米凝膠中。通過紫外—可見光分光光度儀證實(shí)了PMAA納米凝膠的還原響應(yīng)性并研究了其對 DOX的負(fù)載能力和體外釋放情況，體外釋放研究結(jié)果表明，隨著

4、釋放液中還原劑谷胱甘肽的增加，DOX的累積釋放量明顯增加，同時(shí)當(dāng)納米凝膠中BACy含量增加時(shí)，DOX的累計(jì)釋放量也隨之增加。通過體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)證實(shí)，DOX濃度為10μg/mL的載DOX氧化還原響應(yīng)納米凝膠對MCF-7細(xì)胞生長有較顯著的抑制作用。同時(shí)還對所制備不同粒徑的納米凝膠進(jìn)行了血液相容性評價(jià)，結(jié)果表明在相同濃度下，PMAA-300 nm的血液相容性要優(yōu)于PMAA-600 nm。
　　二、葡萄糖敏感納米凝膠藥物載體
　　本體

5、系以乙腈為溶劑、MAA為單體、AIBN為引發(fā)劑，二甲基丙烯酸乙二醇酯為交聯(lián)劑，通過引入另外一種帶有葡萄糖敏感基團(tuán)苯硼酸的單體丙烯酰胺苯硼酸，采用沉淀聚合方法制備出具有葡萄糖敏感的納米凝膠，并將其用于胰島素的控制釋放研究。利用掃描電鏡、激光納米粒度儀、傅里葉紅外變換光譜儀對所制備微球的形貌、粒徑及結(jié)構(gòu)進(jìn)行了表征，實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)得到了形貌規(guī)整的微球，葡萄糖敏感基團(tuán)被成功引入到納米凝膠中。通過紫外—可見光分光光度儀及激光納米粒度儀證實(shí)了納米凝膠

6、的葡萄糖敏感性并研究了其對胰島素的負(fù)載能力和體外釋放情況，體外釋放實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，隨著釋放液中葡萄糖濃度的增加，胰島素的累計(jì)釋放量增加。通過血液相容性實(shí)驗(yàn)證實(shí)，當(dāng)濃度低于10 mg/mL時(shí)，葡萄糖敏感納米凝膠有較好的血液相容性。同時(shí)探究了所制備葡萄糖敏感納米凝膠的細(xì)胞毒性，結(jié)果表明，濃度不高于100μg/mL的葡萄糖敏感納米凝膠對3T3細(xì)胞幾乎沒有細(xì)胞毒性。另外還通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證了葡萄糖敏感納米凝膠不僅可以快速響應(yīng)葡萄糖從而釋放胰島素