腰椎手術(shù)失敗綜合征的臨床研究及預(yù)防硬膜外瘢痕粘連的實驗研究.pdf

1、研究目的
　　 1、通過收集腰椎手術(shù)失敗綜合征的病例，分析目前發(fā)生FBSS的原因并評估相應(yīng)的預(yù)防及處理措施；
　　 2、制備出羥基喜樹堿脂質(zhì)體，并考察其穩(wěn)定性、生物相容性等基本性質(zhì)；
　　 3、通過實驗驗證羥基喜樹堿脂質(zhì)體在新西蘭兔椎板切除術(shù)后模型中有效預(yù)防硬膜與圍組織粘連，且無明顯毒副作用。
　　 研究方法
　　 1、收集自2005年至2011年本治療組收治的腰椎手術(shù)失敗綜合征患者的病例資料，分

2、析其原因并評估處理措施。
　　 2、采用薄膜-超聲分散法制備羥基喜樹堿脂質(zhì)體，10-羥基喜樹堿、磷脂、膽固醇溶于氯仿-甲醛(1:1混合)中。此混合液在全旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀內(nèi)40℃下減壓除去溶媒，加入一定比例的甘露醇或者葡萄糖作為凍干保護(hù)劑，形成薄膜。加入雙蒸水使磷脂的濃度為80mM，洗膜得脂質(zhì)體混懸液。羥基喜樹堿脂質(zhì)體混懸液經(jīng)超聲波、分裝、冷凍、干燥制成羥基喜樹堿脂質(zhì)體凍干粉針備用。
　　 3、在4℃、25℃、40℃等不同溫度下

3、考察凍干羥基喜樹堿脂質(zhì)體穩(wěn)定性，包括外觀、粒徑及包封率，并評估其生物相容性。
　　 4、制備新西蘭兔L5椎板切除術(shù)模型并分組，第一組新西蘭兔硬膜囊以腦棉浸泡羥基喜樹堿溶液濕敷5分鐘后，以生理鹽水沖洗三次，逐層縫合骶棘肌、腰背筋膜及皮膚。第二組新西蘭兔硬膜囊后方放置羥基喜樹堿脂質(zhì)體，逐層縫合骶棘肌、腰背筋膜及皮膚。第三組新西蘭兔硬膜后方以生理鹽水沖洗，逐層縫合骶棘肌、腰背筋膜及皮膚，作為對照組。
　　 5、術(shù)后4周處死實驗

4、動物，取出硬膜外瘢痕組織。Masson染色切片(放大率x400)觀察硬膜外瘢痕中膠原的排列、走向和密度，HE染色切片(放大率x400)觀察硬膜外瘢痕分布，成纖維細(xì)胞、炎癥細(xì)胞分布情況以及粘連程度。利用LeicaQwinPlus計算機圖像分析系統(tǒng)測定硬膜外瘢痕面積及成纖維細(xì)胞數(shù)量；利用流式細(xì)胞儀檢測瘢痕組織中成纖維細(xì)胞凋亡率。
　　 結(jié)果
　　 1、初次手術(shù)方式為單純髓核摘除者，復(fù)發(fā)的原因多為原手術(shù)間隙髓核組織再次突出，本

5、組殘遺髓核復(fù)發(fā)突出者21例，占32.8％；初次手術(shù)方案為髓核摘除+植骨椎弓根螺釘內(nèi)固定，復(fù)發(fā)原因大多為相鄰節(jié)段退變，椎間盤突出，本組臨近節(jié)段退變突出者19例，占29.7％。FBSS的原因并非單一因素，復(fù)發(fā)突出21/64，占32.8％；臨近節(jié)段退變突出19/64，占29.7％；內(nèi)固定失敗6/64，占9.3％；椎間隙感染11/64，占17.2％；硬膜外瘢痕粘連7/64，占10.9％。
　　 2、制備的羥基喜樹堿脂質(zhì)體性質(zhì)穩(wěn)定、生物相

6、容性好，符合實驗要求。
　　 3、在應(yīng)用羥基喜樹堿脂質(zhì)體處理動物模型中，瘢痕組織與硬膜外存在疏松瘢痕組織，與硬膜無明顯粘連，有少量成纖維細(xì)胞與纖維細(xì)胞，未見明顯炎性細(xì)胞；計算機分析硬膜外瘢痕面積與成纖維細(xì)胞計數(shù)也較對照組減少；流式細(xì)胞儀檢測的成纖維細(xì)胞凋亡率明顯增高。
　　 結(jié)論
　　 硬膜外瘢痕粘連是腰椎手術(shù)綜合征的一個重要原因，而且處理困難，預(yù)后不佳；制備所得的羥基喜樹堿脂質(zhì)體性質(zhì)穩(wěn)定，生物相容性好，在新西蘭