他克莫司預(yù)防椎板切除術(shù)后硬膜外瘢痕粘連的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的:探討局部應(yīng)用不同濃度的他克莫司(Tacrolimus，F(xiàn)K506)預(yù)防大鼠椎板切除術(shù)后硬膜外瘢痕粘連的實(shí)驗(yàn)效果。
　　方法:選用健康成年雄性SD大鼠72只，將其隨機(jī)分成4組:0.1mg/ml FK506組、0.05mg/mlFK506組、0.01mg/ml FK506組和生理鹽水對(duì)照組，每組18只。每只大鼠分別行L1椎板切除術(shù)，暴露硬脊膜，制備椎板切除術(shù)動(dòng)物模型。充分止血后，將浸有不同濃度FK506和生理鹽水的棉片覆蓋子裸露

2、的硬脊膜，5min后去除棉片并以生理鹽水沖洗術(shù)野，逐層縫合手術(shù)切口。所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分別于術(shù)前、術(shù)后行后肢運(yùn)動(dòng)功能評(píng)分（BBB功能評(píng)分），并予術(shù)后四周分別行大體觀察和羥脯氨酸含量測(cè)定，切除手術(shù)節(jié)段行HE染色后觀察硬膜外瘢痕粘連程度，對(duì)瘢痕組織中的成纖維細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，并檢測(cè)硬膜外瘢痕組織中相關(guān)因子IL-4和TGF-β mRNA的表達(dá)情況。
　　結(jié)果:所有實(shí)驗(yàn)動(dòng)物術(shù)后恢復(fù)良好，未發(fā)生死亡、皮膚感染等現(xiàn)象。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示(1)局部用藥前后實(shí)驗(yàn)

3、動(dòng)物的BBB評(píng)分均為21分，提示局部用藥未造成實(shí)驗(yàn)大鼠明顯的脊髓損傷。(2)術(shù)后4周沿原手術(shù)區(qū)域行局部解剖，肉眼觀察發(fā)現(xiàn)0.1 mg/ml FK506組硬膜外覆蓋有薄膜樣的瘢痕組織，可以完整剝離，未見(jiàn)或見(jiàn)少量出血;0.05 mg/mlFK506組可見(jiàn)硬膜外有中等程度的粘連，不能完全剝離瘢痕組織;0.01 mg/ml FK506和對(duì)照組可見(jiàn)硬膜外覆蓋有致密的瘢痕組織，與硬脊膜緊密連接，在分離的過(guò)程中有大量出血，并有硬膜囊撕裂現(xiàn)象。(3)0

4、.1 mg/ml FK506組和0.05 mg/ml FK506組瘢痕組織中羥脯氨酸含量明顯低于對(duì)照組(P＜0.05)，而0.01mg/ml FK506組瘢痕組織中羥脯氨酸含量與對(duì)照組相比無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);(4)組織學(xué)觀察發(fā)現(xiàn)0.1 mg/ml FK506組硬膜外有薄膜樣的瘢痕組織，0.05 mg/ml FK506組硬膜外可見(jiàn)疏松樣瘢痕組織，而0.01 mg/ml FK506和對(duì)照組硬膜外可見(jiàn)有致密的瘢痕組織，與硬脊膜緊密連

5、接。(5)0.1 mg/ml FK506組和0.05 mg/ml FK506組的成纖維細(xì)胞計(jì)數(shù)明顯低于0.01mg/ml FK506組和對(duì)照組(P＜0.05)，但是0.01 mg/mlFK506組成纖維細(xì)胞計(jì)數(shù)與對(duì)照組相比，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05);(6)不同濃度的FK506組瘢痕組織中的IL-4 mRNA的表達(dá)量明顯低于對(duì)照組的表達(dá)量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，而0.1 mg/ml FK506組瘢痕組織中的IL-4 m

6、RNA的表達(dá)量明顯低于0.05 mg/ml FK506組的表達(dá)量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);不同濃度FK506組瘢痕組織中的TGF-βmRNA的表達(dá)量明顯低于對(duì)照組的表達(dá)量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)，0.1 mg/ml FK506組瘢痕組織中的TGF-β mRNA的表達(dá)量明顯低于0.05 mg/ml FK506組的表達(dá)量，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　結(jié)論:本實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)局部應(yīng)用0.1mg/ml FK50