手性衍生化HPLC法研究卡維地洛體外葡醛酸化代謝的立體選擇性及藥物相互作用.pdf

1、卡維地洛(Carvedilol)是一新型具有多種藥理作用的8受體阻斷劑，非選擇性阻斷B受體及選擇性阻斷a1受體。卡維地洛的B阻斷和血管擴(kuò)張作用可以產(chǎn)生協(xié)同降壓效應(yīng)，消除由B阻斷引起的外周血管收縮和應(yīng)用一般血管擴(kuò)張劑引起的水鈉潴留等不良反應(yīng)。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明卡維地洛在低濃度時(shí)是B1和a1阻斷劑，高濃度時(shí)是鈣通道拮抗劑?？ňS地洛對(duì)高血壓、心絞痛、充血性心力衰竭(Ⅱ到Ⅲ級(jí))有明顯療效，對(duì)高血壓伴心腎功能不全和糖尿病較安全。與普萘洛爾比較有用量較小

2、、療效好、副作用少的優(yōu)點(diǎn)。在治療心血管病方面有廣闊的應(yīng)用前景。卡維地洛結(jié)構(gòu)中有一個(gè)手性碳原子，存在(R)-和(s)-兩個(gè)對(duì)映體，臨床上以消旋體給藥。兩個(gè)對(duì)殃體藥理作用大不相同，即(S)-卡維地洛的B受體阻斷活性大約是(R)-卡維地洛的200倍，而兩者的a阻斷活性相當(dāng)。因此研究其人體代謝的立體選擇性具有臨床意義?？ňS地洛是降血壓藥物，服藥的大多是中老年人群，他們?cè)诜幍耐瑫r(shí)很可能會(huì)同時(shí)服用其他藥物。在高血壓患者中，只有30％的患者僅用1種

3、藥物可使血壓控制到目標(biāo)水平，而70％的患者需要聯(lián)合應(yīng)用2種或以上藥物才能使血壓獲得理想控制。因此研究代謝性藥物相互作用對(duì)臨床安全用藥有非常重要的指導(dǎo)意義。本文旨在研究卡維地洛體外代謝的立體選擇性和藥物相互作用，探討體外代謝立體選擇性以及卡維地洛與其他化學(xué)藥合用的安全合理性。 1.手性衍生化HPLc法研究卡維地洛體外代謝的立體選擇性目的：研究卡維地洛在人肝微粒體中葡醛酸化反應(yīng)的立體選擇性。方法：卡維地洛葡醛酸結(jié)合物的結(jié)構(gòu)經(jīng)B-葡萄

4、糖醛酸苷酶水解，LC-MS-MS，以及5種人重組UGTs代謝鑒定。用GITC柱前衍生化，以(s)-普羅帕酮為內(nèi)標(biāo)的RP-HPLC法測(cè)定卡維地洛對(duì)映體葡醛酸化酶動(dòng)力學(xué)參數(shù)。結(jié)果：Lc-MS-MS和B-葡萄糖醛酸苷酶水解的結(jié)果都表明觀察到的兩個(gè)代謝峰是葡醛酸結(jié)合物。五種人重組UGTs代謝的結(jié)果表明，兩個(gè)葡醛酸結(jié)合物的結(jié)合方式是O-結(jié)合的可能性較大。經(jīng)回歸分析，(S)-卡維地洛和(R)-卡維地洛的Km和Vmax值分別是118±44μmol.L

5、-1，2500±833μmol/min/mg蛋白和24±7μmol.L-1,953±399μmol/min/mg蛋白。結(jié)論：酶動(dòng)力學(xué)結(jié)果表明人肝微粒體中卡維地洛對(duì)映體葡醛酸化反應(yīng)存在顯著的立體選擇性，這為闡明卡維地洛立體選擇性藥動(dòng)學(xué)的機(jī)理提供了實(shí)驗(yàn)支持。 2.卡維地洛與一些常用化學(xué)藥的相互作用研究目的：研究卡維地洛與一些常用化學(xué)藥的代謝性相互作用，為l臨床合理用藥提供科學(xué)依據(jù)。方法：選擇一些臨床上可能合用的藥物與卡維地洛共孵育。選擇的藥

6、物有：尼群地平等16種降血壓藥，格列本脲等4種降血糖藥，辛伐他汀等6種抗高血脂藥，阿司匹林，酮洛芬等8種解熱鎮(zhèn)痛、抗炎鎮(zhèn)痛藥，鹽酸胺碘酮等3種抗心律失常藥，奧沙西泮等2種抗焦慮藥，酮康唑等其它7種藥物。觀察這些藥物對(duì)卡維地洛葡醛酸化代謝的影響，測(cè)定IC50或Ki值。結(jié)果：在研究的46種藥物中，4種二氫吡啶類藥物和2種他汀類藥物，即，非洛地平，拉西地平，尼莫地平，尼群地平，辛伐他汀和洛伐他汀對(duì)卡維地洛葡醛酸化代謝均有較強(qiáng)的體外抑制作用，測(cè)

7、得的Ki值在0.65-63.48μmol.L-1之間。這6種藥物對(duì)卡維地洛葡醛酸結(jié)合物M1的ki值均低于對(duì)M2的Ki值，對(duì)M1的抑制作用強(qiáng)于對(duì)M2的抑制作用。其中拉西地平對(duì)M1和M2的抑制作用最強(qiáng)，Ki值分別約0.6μmol.L-1和6.44μmol.L-1。另外就尼群地平對(duì)卡維地洛代謝的抑制機(jī)制作了初步研究，應(yīng)用SigmaPlot的酶動(dòng)力學(xué)模塊發(fā)現(xiàn)尼群地平對(duì)M1和M2的抑制類型較符合混合抑制機(jī)制。結(jié)論：四種二氫吡啶類藥物和兩種他汀類藥