Pin1基因啟動(dòng)子的遺傳變異與肺癌危險(xiǎn)因素的病例-對(duì)照研究.pdf

1、肺癌是人類(lèi)最為常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，近幾十年來(lái)發(fā)達(dá)國(guó)家和發(fā)展中國(guó)家的肺癌死亡率皆急劇上升，據(jù)2005年世界衛(wèi)生組織報(bào)告，肺癌是男性最常見(jiàn)的惡性腫瘤，女性肺癌死亡率僅次于乳腺癌，位列第二。在我國(guó)，肺癌已位居我國(guó)腫瘤死因的首位，有關(guān)肺癌的病因及其發(fā)病機(jī)制成為當(dāng)前醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究熱點(diǎn)。肽基脯氨酰順?lè)串悩?gòu)酶（簡(jiǎn)稱(chēng)Pinl）是絲/蘇氨酸磷酸化信號(hào)通路的重要分子，它能特異性地催化磷酸化的絲/蘇-脯氨酸基序發(fā)生異構(gòu)，改變底物蛋白的構(gòu)象，調(diào)節(jié)底物蛋白的功能。

2、研究顯示，Pinl在多種腫瘤組織中過(guò)度表達(dá)，且其過(guò)度表達(dá)能激活多條致癌通路，被稱(chēng)為腫瘤發(fā)生的“催化分子”。該基因的遺傳變異可能與人群肺癌的發(fā)生有關(guān)；本研究擬通過(guò)病例-對(duì)照研究探討中國(guó)南方人群肺癌的主要危險(xiǎn)因素，并深入研究Pinl基因啟動(dòng)子的遺傳變異與肺癌發(fā)病的關(guān)聯(lián)。 第一部分肺癌的病例一對(duì)照研究 目的:探討中國(guó)南方人群發(fā)生肺癌的危險(xiǎn)因素，為肺癌病因研究提供線(xiàn)索，為制定肺癌預(yù)防控制策略和措施提供科學(xué)依據(jù)。 方法:采

3、取病例一對(duì)照研究的方法，收集廣州市部分醫(yī)院2006～2009年新診斷的原發(fā)性肺癌病例808例，按性別、年齡1：1配對(duì)選取808例正常對(duì)照，用由91個(gè)項(xiàng)目組成的問(wèn)卷調(diào)查病例和對(duì)照有關(guān)危險(xiǎn)因素的暴露史，資料統(tǒng)一輸入Excel數(shù)據(jù)庫(kù)，用SAS軟件進(jìn)行單因素和多因素logistic回歸分析，篩選近年來(lái)南方人群肺癌的危險(xiǎn)因素，并與前期研究進(jìn)行對(duì)比分析。 結(jié)果:經(jīng)單因素分析發(fā)現(xiàn)，肺結(jié)核，慢性支氣管炎，腫瘤家族史，醫(yī)源性X線(xiàn)等19個(gè)暴露因素與

4、肺癌發(fā)生有關(guān)，多因素logistic回歸分析結(jié)果顯示與肺癌有關(guān)的6個(gè)主要危險(xiǎn)因素和2個(gè)保護(hù)因素，它們分別是：吸煙，OR及95％可信區(qū)間為2.49（1.86，3.35）；被動(dòng)吸煙來(lái)源于父母，OR為2.23（1.58，3.15）：COPD病史，OR為1.50（1.04，2.16）；腫瘤家族史，OR為1.77（1.20，2.60）；職業(yè)接觸金屬類(lèi)毒物（鎳/鎘/鉻），OR為2.17（1.25，3.76）；醫(yī)源性X線(xiàn)暴露，OR為1.92（1.33

5、，2.76）。保護(hù)因素為廚房安裝油煙機(jī)/排氣扇和經(jīng)常食用蔬菜水果，OR分別為：0.46（0.32，0.67）和0.25（0.19，0.34）。 結(jié)論:引起肺癌發(fā)生的環(huán)境因素與前期研究基本一致，但其OR有所下降，提示肺癌發(fā)生與環(huán)境因素相關(guān)，應(yīng)積極控制環(huán)境危險(xiǎn)因素，以減少肺癌的發(fā)生。 第二部分 Pinl基因啟動(dòng)子的遺傳變異與肺癌發(fā)生之間的關(guān)聯(lián) 目的:分析Pinl基因啟動(dòng)子區(qū)的單核苷酸多態(tài)，探討環(huán)境－基因兩者之間的交互

6、作用在肺癌發(fā)病機(jī)制中的作用，為篩選人群肺癌易感標(biāo)志物提供基礎(chǔ)。 方法:在前期病例－對(duì)照研究的基礎(chǔ)上，提取808例病例組和808例對(duì)照組血液基因組DNA；核酸定量?jī)x檢測(cè)DNA濃度和純度。參考Genebank的SNP數(shù)據(jù)庫(kù)，選取MAF>5％的常見(jiàn)多態(tài)位點(diǎn)，從Pinl基因啟動(dòng)子區(qū)選出2個(gè)潛在性功能位點(diǎn)進(jìn)行研究：-842G>C[rs2233678]，-667C>T[rs2233679]。采取PCR-RFLP方法檢測(cè)基因型，選取部分標(biāo)本經(jīng)

7、PCR-測(cè)序鑒定，驗(yàn)證PCR-RFLP的結(jié)果。 結(jié)果:經(jīng)分析發(fā)現(xiàn)對(duì)照組人群中Pinl基因啟動(dòng)子-667C>T位點(diǎn)符合Handy-weinberg遺傳平衡，而-842G>C位點(diǎn)不符合Handy-weinberg遺傳平衡；-842G>C和-667C>T兩個(gè)SNP位點(diǎn)之間存在較弱的連鎖不平衡（LD）。 Pinl-842G>C和-667C>T基因多態(tài)在病例與對(duì)照之間的分布存在顯著差異。以-842GG基因型為參照，-842GC基

8、因型罹患肺癌的危險(xiǎn)性明顯下降，-842CC基因型與肺癌危險(xiǎn)性下降的關(guān)聯(lián)為顯著性臨界值，該位點(diǎn)基因型與肺癌風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)有顯著的等位基因劑量-效應(yīng)關(guān)系。-842C變異基因型（-842GC和-842CC）與肺癌的危險(xiǎn)性下降有顯著性關(guān)聯(lián)。 以-667CC基因型為參照，-667TC基因型與肺癌危險(xiǎn)性下降的關(guān)聯(lián)為顯著性臨界值，-667TT基因型罹患肺癌的危險(xiǎn)性明顯下降，該位點(diǎn)基因型與肺癌風(fēng)險(xiǎn)的關(guān)聯(lián)性存在顯著的等位基因劑量-效應(yīng)關(guān)系。-667T

9、變異基因型（-667TC和-667TT）患肺癌的危險(xiǎn)性顯著降低。 將兩SNP等位基因變異頻數(shù)（簡(jiǎn)稱(chēng)：變異數(shù)）進(jìn)行二分類(lèi)組合分析，結(jié)果表明，變異數(shù)>1的個(gè)體罹患肺癌的風(fēng)險(xiǎn)將減小37％。分層分析發(fā)現(xiàn)，在年齡、性別、吸煙、飲酒、BMI各亞組中，Pinl基因啟動(dòng)子的遺傳變異均可降低人群發(fā)生肺癌的危險(xiǎn)性，其OR皆<1.00。 結(jié)論:Pinl基因啟動(dòng)子區(qū)域-842C和-667C位點(diǎn)的遺傳變異可顯著降低中國(guó)南方人群罹患肺癌的危險(xiǎn)性，這