羧甲基殼聚糖智能釋藥肝靶向納米傳遞系統(tǒng)的構(gòu)建與評價.pdf

1、肝炎、肝硬化和肝癌等慢性肝臟疾病,極大地危害人體的健康。盡管目前某些藥物能夠達到預(yù)期的治療效果,但由于給藥系統(tǒng)難以將藥物準確傳遞到肝臟病灶細胞而降低了其生物利用度,并產(chǎn)生較大毒副作用,限制了其臨床應(yīng)用。解決這個問題的有效辦法就是靶向給藥系統(tǒng)。
　　 靶向給藥系統(tǒng)能將藥物傳遞到病灶部位,減少用藥劑量和給藥次數(shù),提高藥物治療指數(shù),避免或減輕藥物不良反應(yīng)。二硫鍵對谷胱甘肽的濃度刺激具有強的響應(yīng)性,由于血液中谷胱甘肽的濃度較低(微摩爾級

2、),二硫鍵很穩(wěn)定,能維系納米粒形態(tài)結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性,控制納米粒內(nèi)部包封的藥物不被釋放;而在細胞中,由于谷胱甘肽的濃度相對較高(毫摩爾級),二硫鍵能被谷胱甘肽分解,納米粒結(jié)構(gòu)受到破壞,內(nèi)部藥物被釋放出來。
　　 課題通過半乳糖配基對羧甲基殼聚糖氨基的修飾賦予其主動肝靶向性,通過羧甲基殼聚糖羧基的巰基化,在組裝納米粒的過程中發(fā)生二硫鍵交聯(lián),賦予納米粒高穩(wěn)定性及智能性(即對谷胱甘肽濃度的刺激響應(yīng)性)。主要研究內(nèi)容和結(jié)果如下:
　　

3、 (1)以包封率和粒徑為指標,采用正交設(shè)計優(yōu)化羧甲基殼聚糖納米粒制備工藝,考察了羧甲基殼聚糖分子量對納米粒粒徑及包封率的影響,隨著分子量的增大,納米粒的粒徑及包封率都增大。體外釋放試驗表明,羧甲基殼聚糖納米?？蓪Ω什菟崞鸬骄忈屪饔?分子量較大的羧甲基殼聚糖制備的納米粒的體外釋放較慢。藥動學(xué)研究表明,羧甲基殼聚糖納米粒較甘草酸溶液分布快藥理作用強,能延長體內(nèi)作用時間。小鼠體內(nèi)組織分布表明,將甘草酸制成納米粒后,在肝臟中的分布增大,在腎臟中

4、的分布減少,有利于提高療效,降低毒副作用。
　　 (2)以O(shè)-羧甲基殼聚糖為原料,采用還原胺化法合成得到半乳糖羧甲基殼聚糖(LAC-CMC)。在LAC-CMC納米粒的制備過程中,采用單因素法考察了LAC-CMC分子量、甘草酸濃度、LAC-CMC濃度對包封率及粒徑的影響。體外釋放試驗表明,分子量較大的LAC-CMC制備的納米粒的體外釋放較慢。藥動學(xué)研究表明,半乳糖羧甲基殼聚糖納米粒較羧甲基殼聚糖納米粒藥理作用強。小鼠體內(nèi)組織分布表

5、明,引入肝靶向基團后,納米粒的肝靶向性增強,毒副作用減弱。
　　 (3)半乳糖羧甲基殼聚糖在EDC和NHS催化下,與半胱胺反應(yīng),得到N-半乳糖-O-巰基化羧甲基殼聚糖。采用Ellman's試劑測定了巰基的含量,并考察了半胱胺的用量、反應(yīng)的pH值、反應(yīng)時間對巰基含量的影響。體外釋放實驗表明,交聯(lián)納米粒在模擬血液中72小時的釋放較少,而在模擬細胞液中72小時能將藥物大量的釋放出來,充分證明了交聯(lián)納米粒的智能釋藥性。藥代動力學(xué)實驗表明