大鼠白色念珠菌肺炎顆粒酶變化及顆粒酶與IFN-γ、IL-2相關(guān)性研究.pdf

1、目的:檢測(cè)大鼠白色念珠菌肺炎不同時(shí)期血清顆粒酶(Oranzyme)及健康對(duì)照組相同時(shí)間血清顆粒酶的表達(dá)水平，并同步測(cè)定血清中與細(xì)胞免疫密切相關(guān)的細(xì)胞因子γ-干擾素(IFN-γ)和白細(xì)胞介素-2(Ⅱ-2)的含量變化。分別比較顆粒酶和肺部炎癥改變相關(guān)性及顆粒酶與IFN-Y，Ⅱ-2的相關(guān)性。初步探討大鼠白色念珠菌肺炎顆粒酶表達(dá)特點(diǎn)以及其同IFN-Y，Ⅱ-2之間的關(guān)系，推測(cè)顆粒酶在大鼠白色念珠菌肺炎發(fā)展變化過(guò)程中可能起到的作用及其意義。方法:首

2、先選用健康雄性SD大鼠(150g-180g)40只，隨機(jī)分為1，3，7，11d組，各組10例作為模型組，同時(shí)選用同等條件SD大鼠40只，隨機(jī)分為1，3，7，11d組，各組l0例作為對(duì)照組。其次制備白色念珠菌肺炎動(dòng)物模型，將大鼠腹腔注射氯胺酮(100mg/Kg體重)麻醉后，從氣管注入白色念珠菌0.4ml，(每0.1ml約106CFU/ml，)。之后各組實(shí)驗(yàn)對(duì)象在無(wú)菌操作下腹腔注射麻醉氯胺酮后將大鼠的左肺取下，取1cm×1cm組織塊在無(wú)菌條

3、件下剪碎，置入沙保弱瓊脂培養(yǎng)基，在35度下培養(yǎng)48小時(shí)，計(jì)數(shù)白色念珠菌的量。右肺組織做石蠟包埋切片HE染色鏡下觀察肺組織病理改變，并參照Szapiel等方法評(píng)分行肺泡炎嚴(yán)重程度積分，同時(shí)心室腔穿刺抽血，經(jīng)離心后取血清，采用雙抗體夾心ABC-EI,ISA法測(cè)定血清顆粒酶、IFN-Y、Ⅱ-2水平。應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析與統(tǒng)計(jì)學(xué)圖表繪制，(α=0.05，P<0.05)有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1、肺組織病理學(xué)改變:各對(duì)照組均無(wú)病

4、理改變。大鼠白色念珠菌肺炎模型組第1天有輕度肺泡炎改變，第3，7天肺泡炎程度較重，血管擴(kuò)張，充血出血，肺泡壁增厚，肺泡腔及肺泡壁有較多炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，病變區(qū)域肺泡萎縮。第11天肺泡炎程度有明顯好轉(zhuǎn)。與對(duì)照組比較，1、3、7天肺泡炎嚴(yán)重程度積分模型組明顯增高(P均<0.05)，11天兩組比較無(wú)明顯差別(P>0.05)，模型組肺泡炎嚴(yán)重程度積分3d>7d>1d>11d(P均<0.05)。2、肺組織細(xì)菌培養(yǎng)48小時(shí)，正常對(duì)照組無(wú)白色念珠菌生長(zhǎng)；

5、模型組1、3、7、11天組可見(jiàn)白色念珠菌生長(zhǎng)，以1、3、7天生長(zhǎng)明顯，11天模型組同對(duì)照組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3、白色念珠菌肺炎模型組第1、3、7天顆粒酶，IFN-Y，Ⅱ-2值較正常對(duì)照組增高，兩組存在顯著性差異(P<0.05)。11天模型組與對(duì)照組比較無(wú)顯著差異(P>0.05)。組內(nèi)比較3d>7d>1d>11d(P均<0.05)。顆粒酶表達(dá)與肺泡炎積分、血清IFN-γ、Ⅱ-2濃度變化呈正相關(guān)性，其相關(guān)系數(shù)(r)分別為0.