PAX2在單側輸尿管梗阻大鼠腎小管間質纖維化中的作用.pdf

1、目的:通過檢測全長配對盒基因2(pairedbox2，PAX2)和α-平滑肌肌動蛋白(α-smoothmuscleactin，α-SMA)在單側輸尿管梗阻(unilateralureteralobstruction，UUO)大鼠腎臟組織中的表達，初步探討PAX2在腎小管間質纖維化(renaltubulointerstitialfibrosis，RIF)中的作用機制。 方法： 48只雄性6周齡Wistar大鼠隨機分為模型組

2、和對照組，每組24只。模型組在無菌條件下左側背部肋下切口行左側輸尿管結扎術，對照組只探及腎包膜，不結扎輸尿管。于造模后第7、14、21、28天各處死大鼠6只，取左側腎臟組織做HE和Masson染色觀察腎臟病理改變，計算腎小管間質纖維化指數。采用實時熒光定量聚合酶鏈式反應(real-timequantitativereversetranscriptionpolymerasechainreaction,RQ-RTPCR)方法檢測腎臟組織PA

3、X2mRNA表達，免疫組織化學方法檢測腎臟組織纖維連接蛋白(fibronectin，FN)、IV型膠原(collagen-IV，Col-IV)、α-SMA和PAX2的蛋白表達。 結果： (1)病理結果顯示：對照組大鼠各時間點腎小管及間質均無明顯變化。與對照組比較，模型組大鼠各時間點腎小管間質纖維化指數均顯著增高(P<0.05)，梗阻時間越長，腎小管間質纖維化指數越高。 (2)與對照組比較，模型組大鼠各時間點腎臟組

4、織FN及Col-IV的蛋白表達均顯著增高(P<0.01)，梗阻時間越長，FN及Col-IV的蛋白表達越高，于第28天表達最高。 (3)對照組大鼠在腎血管平滑肌肌層有α-SMA蛋白表達，偶在腎小管間質細胞表達。模型組大鼠除在腎血管平滑肌肌層有α-SMA蛋白表達外，主要在腎小管基底膜側和腎間質細胞胞漿中表達。與對照組比較，模型組大鼠各時間點腎臟組織α-SMA的蛋白表達均顯著增高(P<0.01)，梗阻時間越長，α-SMA的蛋白表達越高

5、，于第28天表達最高。 (4)對照組大鼠腎臟組織僅有少量PAX2mRNA表達，腎小管上皮細胞未見PAX2蛋白表達，偶在腎小球囊細胞內有微量PAX2蛋白表達。與對照組比較，模型組大鼠各時間點PAX2的mRNA及其蛋白表達均顯著增高(P<0.01)，梗阻時間越長，腎臟組織PAX2的mRNA及其蛋白表達越高，于第28天表達最高。 (5)直線相關分析顯示：模型組大鼠腎小管上皮細胞PAX2的蛋白表達與腎間質的α-SMA、FN及Co

6、l-IV的蛋白表達均呈顯著正相關(r=0.880，0.67，0.75，均P<0.05)，PAX2、α-SMA的蛋白表達均與腎小管間質纖維化指數呈顯著正相關(r=0.886，0.918，均P<0.05)。 結論： UUO所致RIF大鼠腎臟組織PAX2的mRNA及其蛋白表達顯著增高，可能參與了腎小管上皮細胞-肌成纖維細胞轉分化(tubularepithelial-myofibroblasttransdifferentiati