益氣活血方對糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)細(xì)胞凋亡及其調(diào)控相關(guān)因子的影響.pdf

1、目的:通過研究益氣活血方對糖尿病大鼠坐骨神經(jīng)細(xì)胞凋亡及Bax、Bcl-2及Caspase-3的影響，探討益氣活血方對糖尿病周圍神經(jīng)病變的干預(yù)作用，為該方在臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:將40只雄性健康Wistar大鼠，體重240-260g。適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，隨機(jī)抽取10只作為正常對照組，給予常規(guī)飼養(yǎng);余30只給予實(shí)驗(yàn)造模，喂養(yǎng)高糖高脂飼料。于第4周末，實(shí)驗(yàn)組給予鏈脲佐菌素STZ（溶于0.1mol/L檸檬酸鹽緩沖液中，pH4

2、.3，4℃）45mg/kg一次性腹腔注射，對照組腹腔注射等體積的檸檬酸鹽緩沖液。在第6周末，實(shí)驗(yàn)組大鼠測血糖＞16.7mmol/L，且存在胰島素抵抗者，即成模型，成模率90‰共27只。將成模的大鼠27只隨機(jī)分為模型組、中藥組、西藥組3組，每組9只。中藥組給益氣活血方藥(25g/kg.d)灌胃，西藥組給予彌可保(0.5mg/kg.d)灌胃，對照組和模型組用相同體積蒸餾水灌胃，每日1次，給藥干預(yù)8周。實(shí)驗(yàn)周期內(nèi)，測量大鼠的體重及血糖，并觀察

3、其一般情況。實(shí)驗(yàn)結(jié)束，用TUNEL法檢測神經(jīng)細(xì)胞的凋亡水平和免疫組化方法測定bax、bcl-2和caspase-3的表達(dá)。
　　 結(jié)果:
　　 1、各組大鼠一般情況
　　 實(shí)驗(yàn)期間，對照組大鼠基本情況正常;在第3周后，實(shí)驗(yàn)組緩慢出現(xiàn)多飲、多尿、精神萎靡，毛色暗淡無光澤;第4周實(shí)驗(yàn)組腹腔注射STZ造模4天后，大鼠出現(xiàn)不安定，反應(yīng)遲鈍，被毛蓬松，臀部毛色發(fā)黃，逐漸消瘦;飲水量、食量及尿量明顯增加，大便不成形，籠中墊料

4、酸腐等癥狀;出現(xiàn)糖尿病周圍神經(jīng)病變癥狀。從第6周開始給予藥物干預(yù)連續(xù)8周期間，除模型組外，中藥組、西藥組大鼠癥狀逐漸減輕，效果隨治療時間延長較為明顯。
　　 2、大鼠體重、血糖變化
　　 2.1、大鼠體重變化
　　 1周末時，各組體重差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。4周末時，各組體重差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。與正常對照組相比，各組大鼠體重均有增加(P＜0.05);模型組、西藥組、中藥組，差異無統(tǒng)計學(xué)意

5、義(P＞0.05)。6周末時，各組體重差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。與正常對照組相比，各組大鼠體重均有增加（P＜0.05）;模型組、西藥組、中藥組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。藥物干預(yù)8周后，各組之間差異顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。與正常對照組相比，各組大鼠體重均下降(P＜0.05)，以模型組最為明顯＞西藥組＞中藥組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 2.2、大鼠血糖變化
　　 1周末時，

6、各組血糖差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。4周末時，各組血糖差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.001）。與正常對照組相比，各組大鼠血糖均有增加(P＜0.05);模型組、西藥組、中藥組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。6周末時，各組血糖差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001)。與正常對照組相比，各組大鼠血糖均有增加(P＜0.05);模型組、西藥組、中藥組，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。藥物干預(yù)8周后，各組之間差異顯著，有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.001

7、)。與模型組相比，中藥組血糖降低明顯(P＜0.05);西藥組對降低血糖有意義，但是不明顯(P＞0.05);中藥組和西藥組相比降糖效果明顯（P＜0.05）。
　　 3、坐骨神經(jīng)細(xì)胞凋亡檢測結(jié)果
　　 正常對照組坐骨神經(jīng)細(xì)胞凋亡較少，各組大鼠凋亡細(xì)胞均顯著增多(P＜0.05);與模型組相比，彌可保組和益氣活血方組大鼠坐骨神經(jīng)凋亡細(xì)胞均顯著減少(P＜0.05)，以中藥組更為明顯。
　　 4、Caspase-3、Bcl-

8、2及Bax的變化
　　 與正常對照組相比，其余三組Caspase-3、Bax的表達(dá)均顯著增多，Bcl-2明顯降低，有統(tǒng)計學(xué)差異(P＜0.05)。與模型組相比，中藥組和彌可保組Caspase-3、Bax的表達(dá)均顯著減少，Bcl-2明顯提高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義;中藥組與彌可保組向比較，中藥組具有顯著差異。
　　 結(jié)論:
　　 1、對于糖尿病的大鼠一般情況、體質(zhì)量、血糖方面，益氣活血方的干預(yù)作用優(yōu)于彌可保。