創(chuàng)傷后異位骨化發(fā)病機(jī)理及干預(yù)研究.pdf

1、本文對(duì)創(chuàng)傷后異位骨化發(fā)病機(jī)理及干預(yù)進(jìn)行了研究。本研究分為三個(gè)部分：
　　 第一部分：
　　 目的：通過固定并施加暴力相結(jié)合手法和肌肉間植入自體骨髓兩種方法誘導(dǎo)動(dòng)物形成異位骨化，初步探討其形成機(jī)制，為異位骨化的研究奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 方法：制備動(dòng)物模型：⑴用新西蘭白兔10只,進(jìn)行強(qiáng)力被動(dòng)扭轉(zhuǎn)、暴力按摩,造成右膝關(guān)節(jié)及周圍軟組織損傷,然后用石膏固定右膝關(guān)節(jié)和踝關(guān)節(jié)于伸直位，不固定右髖關(guān)節(jié)。每天最大范圍活動(dòng)膝關(guān)節(jié)5

2、min，活動(dòng)后重新固定；石膏干固后將兔放回籠內(nèi), 單籠飼養(yǎng)，此操作每周6天持續(xù)5周。10周后行X線和組織學(xué)檢查。⑵用新西蘭白兔10只，無菌條件下，先從左股前外側(cè)入路，抽取左股骨骨髓2ml，再右股前外側(cè)入路，將左股骨中段抽取的自體骨髓注入新西蘭白兔右股骨外側(cè)肌肉間，閉合傷口。4周后行X線和組織學(xué)檢查。
　　 結(jié)果：X線和組織學(xué)檢查顯示10周后，行固定并同時(shí)施加暴力手法誘導(dǎo)異位骨化的白兔均在右股骨中部周圍出現(xiàn)異位骨；4周后，行肌肉間

3、注入自體骨髓的白兔均在右股骨中部周圍出現(xiàn)異位骨出現(xiàn)異位骨。
　　 結(jié)論：固定并同時(shí)施加暴力手法和肌肉間注入自體骨髓兩種方法可有效誘導(dǎo)異位骨化，結(jié)果穩(wěn)定可靠。
　　 第二部分：
　　 目的：檢測(cè)及評(píng)價(jià)BMP-2、COX-2及VEGF在創(chuàng)傷后異位骨化發(fā)生過程中的表達(dá)和作用，探討創(chuàng)傷后異位骨化的發(fā)生機(jī)制。
　　 方法：通過對(duì)新西蘭白兔固定并同時(shí)施加暴力方法構(gòu)建異位骨化模型，采用免疫組化SP法檢測(cè)10例創(chuàng)傷后異位

4、骨化組織及10例正常骨組織中COX-2、BMP-2和VEGF表達(dá)水平，利用HPIAS-1000圖像分析系統(tǒng)測(cè)定異位骨化組織與正常骨組織COX-2、BMP-2和VEGF的平均光密度和陽性區(qū)域面積百分率，并分析三種蛋白陽性區(qū)域面積百分率之間的相關(guān)性。
　　 結(jié)果：⑴異位骨化組織中COX-2、BMP-2和VEGF呈高表達(dá)；正常骨組織中COX-2、BMP-2和VEGF呈低表達(dá)或不表達(dá)。圖像分析結(jié)果顯示兩組間差異有顯著性意義(P

5、)。⑵異位骨化組織中BMP-2和VEGF與COX-2呈正相關(guān)，BMP-2與VEGF呈正相關(guān)。
　　 結(jié)論：COX-2、BMP-2和VEGF在HO的形成過程中起重要作用，COX-2通過誘導(dǎo)BMP-2和VEGF的表達(dá)而促進(jìn)HO組織中的成骨和血管形成。
　　 第三部分：
　　 目的：研究自由基清除劑依達(dá)拉奉對(duì)創(chuàng)傷后異位骨化(H0)形成中骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2（BMP-2）及環(huán)氧化酶-2（COX-2）表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。

6、　　 方法：54只新西蘭白兔隨機(jī)分成實(shí)驗(yàn)組、模型組、對(duì)照組，每組18只。實(shí)驗(yàn)組和模型組兔適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后建立H0模型，對(duì)照組兔不建立H0模型，操作后第1天即開始給藥。實(shí)驗(yàn)組給予依達(dá)拉奉30 mg/次，靜脈滴注，每日2次，模型組和對(duì)照組給予等量生理鹽水靜脈滴注。用藥6周和10周模型組和對(duì)照組兔分別攝X線片評(píng)價(jià)H0發(fā)生。用藥6周每組隨機(jī)處死半數(shù)新西蘭白兔，10周后處死剩余白兔, 切取H0組織, 免疫組化檢測(cè)組織中BMP-2及COX-2的表

7、達(dá)。
　　 結(jié)果：用藥6周和10周，模型組H0發(fā)生較對(duì)照組明顯增多，H0組織中BMP-2和COX-2表達(dá)較對(duì)照組增多，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)；實(shí)驗(yàn)組H0組織中BMP-2和COX-2表達(dá)較模型組減少，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。實(shí)驗(yàn)組用藥10周H0組織中BMP-2和COX-2表達(dá)較6周減少，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01)。
　　 結(jié)論：BMP-2及COX-2表達(dá)水平上調(diào)是創(chuàng)傷后H0發(fā)生的重要機(jī)制。自由基清除劑依達(dá)拉奉