皇菊水溶性色素純化、成分分析及其體外α-葡萄糖苷酶抑制活性研究.pdf

1、本文以皇菊為研究對象，對皇菊色素進(jìn)熱水浸提法提取，將皇菊水溶性色素利用大孔樹脂進(jìn)行純化，并通過溶解性觀察、顯色反應(yīng)進(jìn)行色素成分定性分析，然后利用硅膠柱層析和HPLC進(jìn)行色素成分分離和純度檢測，利用其生物功能進(jìn)行色素穩(wěn)定性和生物體外α-葡萄糖苷酶抑制活性研究，以此評價(jià)其降糖活性功能。
　　試驗(yàn)結(jié)果如下：
　　（1）本文通過比較8種樹脂的吸附和解吸性能，進(jìn)而篩選出對皇菊水溶性色素純化效果最佳的DM-28樹脂。利用DM-28大孔樹

2、脂進(jìn)行皇菊水溶性色素靜-動態(tài)吸附和解吸工藝研究，得出最佳優(yōu)化工藝條件為：靜態(tài)吸附-解吸條件為：吸附平衡時(shí)間3h，樣液濃度A390=0.361（即稀釋12倍），樣液pH=2.4，吸附溫度30℃；在pH=3.0，50%乙醇溶液條件下解吸；動態(tài)吸附-解吸條件為：上樣濃度 A390=0.361（即稀釋12倍），上樣流速2.0mL/min，以流速1mL/min，80%乙醇洗脫。純化后色素色價(jià)為22.5，是純化前的3.65倍。通過上述研究，DM-2

3、8大孔樹脂展現(xiàn)了比較全面的吸附性能，可以為大規(guī)模工業(yè)化生產(chǎn)提供理論基礎(chǔ)。
　　（2）皇菊水溶性色素穩(wěn)定性研究結(jié)果顯示：光照時(shí)間、常用食品添加劑如蔗糖、檸檬酸、酒石酸對皇菊色素穩(wěn)定性基本沒影響，但是葡萄糖對皇菊色素有增色效果，而乳糖對色素穩(wěn)定性作用卻相反；皇菊色素表現(xiàn)出較好的耐酸堿性，對一定范圍的酸堿度不敏感；90℃以上溫度對色素會造成一定的降解，因此在產(chǎn)品生產(chǎn)過程中要注意高溫，防止色素結(jié)構(gòu)發(fā)生變化以至于降解；還原劑的存在會加速色素

4、的降解，且隨濃度的增加，色素降解程度更嚴(yán)重；大多數(shù)金屬離子對色素穩(wěn)定性影響不大，但有色金屬離子如Fe3+、Cu2+存在會對皇菊色素穩(wěn)定性造成很大影響，所以生產(chǎn)和貯存過程應(yīng)回避與這些金屬離子的正面直接接觸?；示丈叵鄬碚f比較穩(wěn)定，對外界條件不是很敏感，可以考慮作為一種天然色素添加到食品工業(yè)當(dāng)中。
　?。?）皇菊水溶性色素抑制物體外α?葡萄糖苷酶抑制活性測試結(jié)果表明：皇菊色素抑制物對α?葡萄糖苷酶的抑制作用具有良好的量效關(guān)系，有顯著

5、的抑制效果，通過SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析可知：純化后、純花前、阿卡波糖對α?葡萄糖苷酶的抑制效果的IC50值分別為0.307、0.779、0.521mg/mL；且與酶結(jié)合反應(yīng)迅速，其作用為非競爭性抑制，可以考慮將皇菊水溶性色素提取物開發(fā)成一種α?葡萄糖苷酶抑制劑。
　?。?）通過樣品溶解性觀察、顯色試驗(yàn)對色素水溶性成分進(jìn)行了定性分析，初步判斷皇菊水溶性色素主要成分為具有鄰二酚羥基二氫黃酮醇類化合物；而后采用硅膠柱層析分離手段得到1