去除ABO血型抗體制備通用型血液制劑的研究.pdf

1、與同型輸注血液制劑比較，通用型血液制劑具有很多優(yōu)點(diǎn)：不需要血型鑒定及交叉配血，節(jié)省時(shí)間，減少由于血型不合引起的溶血性輸血反應(yīng)，可用于任何一種血型患者輸用等。對(duì)于O型血液來(lái)說(shuō)，確定O型血液中ABO血型抗體的分布、選擇合適的ABO血型抗體吸附劑、探尋去除抗體吸附劑的方法，從而為臨床提供安全有效的通用型血液制劑是制備去除ABO血型抗體的通用型血液制劑成功的關(guān)鍵及難點(diǎn)。從這個(gè)研究理念出發(fā)，筆者進(jìn)行了三個(gè)部分的研究工作： 一、O型紅細(xì)胞懸

2、液或全血中ABO血型抗體的分布情況研究。確定北京地區(qū)ABO血型抗體在O型紅細(xì)胞懸液及O型全血中的分布情況，研究制備新型通用型紅細(xì)胞的可行性。采用鹽水法測(cè)定IgM型抗體效價(jià)，采用二巰基乙醇破壞IgM型抗體后，采用凝聚胺試驗(yàn)檢測(cè)IgG型抗體效價(jià)的方法，檢測(cè)北京地區(qū)263例“O”型紅細(xì)胞懸液中IgM型、IgG型抗-A、抗-B效價(jià)及255例“O”型全血中IgM型、IgG型抗-A、抗-B效價(jià)，結(jié)果顯示，抗-A抗體(IgM型和IgG型)主要分布在效

3、價(jià)16-128之間，以效價(jià)64最多；抗-B抗體(IgM型和IgG型)主要分布在效價(jià)8-64，以效價(jià)16、32、64分布最多；O型紅細(xì)胞懸液血漿中的ABO血型抗體的分布與O型全血血漿中ABO血型抗體(IgM型和IgG型)的分布相似；從效價(jià)分布看出，如果以效價(jià)64為安全的受血效價(jià)，有近30％的A型和B型的受血者接受效價(jià)高于64的O型血液將會(huì)引起輸血反應(yīng)。因此，選擇合適的ABO血型抗體吸附劑是下一步研究的內(nèi)容。 二、ABO血型抗體吸附

4、劑--凍干紅細(xì)胞膜的制備、保存及特性檢測(cè)研究。確定A型、B型凍干紅細(xì)胞膜為ABO血型抗體吸附劑，結(jié)果顯示，海藻糖作為凍干保護(hù)劑能很好的保存紅細(xì)胞膜的抗原性，冰凍干燥技術(shù)保存了紅細(xì)胞膜的抗原性(凍干后，作為吸附劑吸附前后，抗體效價(jià)比較無(wú)顯著性差異P＜0.01)。確定了復(fù)溶的凍干紅細(xì)胞膜液與O型血血漿的最適反應(yīng)條件為：復(fù)溶的凍干紅細(xì)胞膜液與O型紅細(xì)胞懸液血漿體積比為1：10，在室溫條件(20±3℃)下，反應(yīng)25±5min。 三、通用

5、型血液制劑的制備研究。研究發(fā)現(xiàn)，O型紅細(xì)胞懸液或全血中分別加入凍干的A型、B型紅細(xì)胞膜后，血漿中的血型抗體(IgM型抗體和IgG型)效價(jià)有不同程度的降低，降低程度為80％-99％。凍干紅細(xì)胞膜作為固體吸附劑去除紅細(xì)胞懸液或全血血漿中的血型抗體后，紅細(xì)胞懸液中紅細(xì)胞的功能沒(méi)有改變：吸附前后ATP無(wú)明顯變化，變形指數(shù)、脆性試驗(yàn)、上清游離Hb含量實(shí)驗(yàn)前后的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)；全血中紅細(xì)胞的功能指標(biāo)沒(méi)有改變：ATP、變形指數(shù)、脆

6、性試驗(yàn)、上清游離Hb含量、乙酰膽堿酯酶在吸附前后比較無(wú)明顯差異(P＞0.05)，全血血漿中凝血因子Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ活性吸附前后無(wú)顯著性差異(P＞0.05)：O型血漿中加入凍干紅細(xì)胞膜前后，血漿中凝血因子活性無(wú)顯著性差異(P＞0.05)。探討了凍干紅細(xì)胞膜在O型紅細(xì)胞懸液和血漿中的去除方法，實(shí)驗(yàn)顯示，通過(guò)適當(dāng)?shù)碾x心，O型紅細(xì)胞懸液中紅細(xì)胞膜的清除率可達(dá)到77％，而高速離心(3500轉(zhuǎn)/min，3min)，去除血漿中紅細(xì)胞膜碎片效果最好，清除率可