動物體內(nèi)馬兜鈴酸A的分析方法及其代謝動力學和分布研究.pdf

1、馬兜鈴酸是一大類硝基菲類化合物,許多馬兜鈴屬植物都含有該類化合物,其中以馬兜鈴酸A分布最廣,含量較高.隨著現(xiàn)代中藥研究工作的深入,馬兜鈴酸成分的腎毒性被逐漸揭示,而研究認為這種腎毒性主要來源于馬兜鈴酸A.該研究旨在以馬兜鈴酸A為代表建立馬兜鈴酸類化合物的體內(nèi)分析方法,研究其在生物體內(nèi)的代謝動力學及組織分布規(guī)律,為進一步探討馬兜鈴酸的腎毒性機理提供研究基礎(chǔ).為了建立生物材料中馬兜鈴酸A的檢測方法,該研究在考察了萃取溶劑、萃取方式等條件的基

2、礎(chǔ)上確定前處理方法為:采用甲醇兩次沉淀蛋白,離心后取上清液,60℃水浴上通空氣流揮干,流動相溶解殘渣,離心后上清液進樣分析.選用離子抑制反相高效液相色譜法作為檢測手段.色譜條件為:Diamonsil C<,18>柱(4.6×150mm,5μm)為分析柱,同樣填料的短柱為預柱,流動相為甲醇-20mmol/L醋酸銨溶液(冰醋酸調(diào)pH至5.5)=58:42,在316nm波長處檢測,同時DAD檢測器采集紫外全光譜.采用萘普生作為內(nèi)標,以馬兜鈴酸

3、A的色譜行為及DAD采集的全光譜信息作為定性的依據(jù),以馬兜鈴酸A與內(nèi)標物峰面積之比作為定量的依據(jù).運用所建立的前處理及檢測方法分析了血漿、組織等生物材料中馬兜鈴酸A的含量,并對所建方法進行了系統(tǒng)評價(線性關(guān)系及檢測限、精密度、回收率).結(jié)果表明,所建方法線性關(guān)系良好、準確度和精密度高、回收率較高、分析速度較快.運用所建立的分析方法,以大鼠為實驗動物,對生物體內(nèi)馬兜鈴酸A的代謝動力學進行了研究.按50mg/kg劑量給大鼠灌服馬兜鈴酸A后,

4、于不同時間點斷尾采血并檢測其中馬兜鈴酸A的含量,繪制藥-時曲線,擬合動力學模型.結(jié)果表明,馬兜鈴酸A的體內(nèi)過程符合二室模型,權(quán)重為1/C/C.初步探討了馬兜鈴酸A在生物體內(nèi)的分布情況.實驗結(jié)果表明,馬兜鈴酸A在心、肝、肺、腎組織中均有分布,其中在腎組織中的分布明顯高于在其他組織中的分布.該課題建立了馬兜鈴酸A的體內(nèi)分析方法,首次研究了馬兜鈴酸A經(jīng)灌服給藥后在生物體內(nèi)的代謝動力學規(guī)律和分布情況,為馬兜鈴酸中毒的臨床診斷以及法醫(yī)鑒定提供了手