抗人大腸癌單鏈抗體在動物體內(nèi)的分布和藥代動力學(xué)研究.pdf

1、大腸癌是發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一,在中國已位居第四位,死亡率呈逐年上升趨勢.探討有效的診斷和治療手段是大腸癌研究的重要課題.近年來以單克隆抗體(單抗)作為載體的大腸癌導(dǎo)向診斷和治療取得了一定進(jìn)展,但由于鼠源性抗體帶有較強(qiáng)的免疫源性,多次給藥易產(chǎn)生人抗鼠抗體(HAMA),同時(shí)完整抗體分子過大(Mr150 000),難以穿透腫瘤毛細(xì)血管,一定程度上限制了其臨床應(yīng)用.為此,采用基因工程技術(shù)將鼠源性抗體進(jìn)行改造,制備新型抗體成為近年抗體研究的重

2、要課題,如:制備人-鼠嵌和抗體、人源化抗體、單鏈抗體等,均可不同程度克服上述缺陷.單鏈抗體是目前應(yīng)用最為廣泛的重組抗體,它由抗體分子中構(gòu)成抗原結(jié)合部位的重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)借助一連接短肽連接而成.相對完整抗體及Fab抗體片段,單鏈抗體的優(yōu)勢在于分子量較小(Mr30 000,相當(dāng)于完整抗體的1/6),使其能夠迅速滲透到實(shí)體瘤內(nèi)部,此外,由于沒有Fc段,免疫源性大大降低,同時(shí)不能與非靶細(xì)胞的Fc受體結(jié)合,更利于集中到達(dá)腫瘤部位,使其有可能

3、成為腫瘤診斷和治療的導(dǎo)向載體.ND-1是宋今丹于1986年以人大腸癌細(xì)胞系CCL-187為免疫源制備的鼠抗人大腸癌單克隆抗體,已進(jìn)行的近千例臨床血清和病理組織檢測顯示,該單抗對高中分化大腸癌組織具特異結(jié)合活性,并優(yōu)于目前廣泛采用的美國商業(yè)產(chǎn)品抗CEA單抗.方瑾于2001年將抗人大腸癌單克隆抗體ND-1的重鏈可變區(qū)和輕鏈可變區(qū)基因進(jìn)行重組構(gòu)建了單鏈抗體ND-1 scFv,并成功地在大腸桿菌中進(jìn)行了有效表達(dá),體外實(shí)驗(yàn)證實(shí)具有較好的免疫學(xué)活性