茶多酚對急性呼吸窘迫綜合征兔肺MAPK、c-Fos和HO-1表達的影響.pdf

1、目的：ARDS是全身炎癥反應(yīng)綜合征(SIRS)在肺部的表現(xiàn)，NF-κB信號傳導(dǎo)通路的過度活化在ARDS的發(fā)病過程中發(fā)揮著重要的作用。我們在前期的實驗中發(fā)現(xiàn)，在油酸誘導(dǎo)的ARDS兔肺組織中，NF-κB、TNF-α和IL-1出現(xiàn)高表達，經(jīng)氣管超聲霧化吸入EGCG后，可抑制肺組織NF-κB、TNF-α和IL-1的表達，而導(dǎo)致肺組織炎性反應(yīng)減輕。 有絲分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activatedproteinkinase，MA

2、PK)是存在于大多數(shù)細胞內(nèi)的一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，在炎癥反應(yīng)過程中起重要調(diào)節(jié)作用。在將細胞外不同的刺激信號轉(zhuǎn)導(dǎo)至細胞內(nèi)及細胞核內(nèi)，引起細胞生物學(xué)反應(yīng)過程中起了非常重要的作用。目前已發(fā)現(xiàn)存在著下列四條并行的MAPK信號通路：①ERK(extracellularsignal-regulatedkinase)信號通路；②JNK/SAPK通路，c-Jun氨基末端激酶(c-JunN-terminalkinaseJNK)又被稱為應(yīng)激活化蛋白激

3、酶(stress-activatedproteinkinase，SAPK)，該信號通路可被應(yīng)激刺激激活；③p38MAPK通路，與JNK相似，同屬應(yīng)激激活的蛋白激酶，其激活劑與JNK通路相似。④ERK5通路，目前研究較少。研究證實，JNK/SAPK和p38MAPK通路主要參與了氧化、應(yīng)激等條件下細胞的免疫調(diào)節(jié)、炎癥反應(yīng)和細胞凋亡過程，因此，我們選用JNK1和p38MAPK兩條通路，探討ARDS時肺組織的病理改變機制及茶多酚(EGCG)對這

4、兩條細胞信號通路激活的干預(yù)作用、茶多酚對ARDS兔肺的保護作用以及不同途徑給藥的效果對比。 血紅素氧合酶(hemooxygenase，HO-1)是一種催化血紅素降解為一氧化碳、鐵和膽紅素的起始酶和限速酶，近年來發(fā)現(xiàn)它具有較好的組織器官保護作用，有著重要的生物學(xué)意義。細胞內(nèi)核轉(zhuǎn)錄因子如NF-κB、AP-1等，在調(diào)控炎癥反應(yīng)細胞因子基因表達的同時，也調(diào)控著HO-1、γ-GCS等抗氧化反應(yīng)因子的基因表達。我們在實驗中觀察了HO-1在A

5、RDS兔肺組織的表達，及茶多酚對其干預(yù)作用。 方法：57只健康成年日本大耳白兔分成EGCG灌胃組、EGCG超聲霧化吸入組和對照組。頸內(nèi)靜脈注射20％乳化油酸建立油酸型ARDS模型，分別于通氣1小時、2小時、3小時、4小時抽血氣分析結(jié)果，機械通氣4小時后結(jié)束實驗，處死兔后取肺大體標本，在相同部位取肺組織病理標本，分別做HE染色和免疫組化染色，觀察病理改變及P38MAPK、JNK1、c-Fos、HO-1在肺組織的陽性表達。

6、結(jié)果：(1)PaO2、和PaCO2指標分析，就整個模型而言，分組因素和時間因素對整個實驗的影響是有極其顯著性意義(P＜0.01)，并且，時間與分組因素之間存在著顯著性的交互作用(P＜0.01)；但對照組和EGCG灌胃組間的差異無顯著性(P＞0.05)，而對照組和EGCG超聲霧化吸入組，EGCG超聲霧化吸入組和EGCG灌胃組之間的差異是有顯著性的。就PaCO2指標而言，3個實驗組中，1h和2h相比，差異無顯著性(P＞0.05)，而1h與3

7、h、4h，2h與3h、4h，3h與4h相比，差異均有顯著性(P＜0.01)；而就PaO2指標而言，1h、2h、3h、4h這4個時間點的差異，均有顯著性(P＜0.01)。(2)對照組和EGCG灌胃組肺組織大體標本可見彌漫性出血、充血、實變，病變程度隨動物重力體位逐漸加重，表面滲出也逐漸加劇。EGCG超聲霧化吸入組，出血、充血、實變程度較輕，病變范圍相對較小。(3)對照組和EGCG灌胃組光鏡下見肺泡壁水腫、增厚，肺泡壁內(nèi)血細胞浸潤、炎癥細胞

8、浸潤，肺間質(zhì)水腫、增厚，肺泡上皮腫脹，部分肺泡萎陷，甚至肺泡結(jié)構(gòu)完全破壞，肺間隔增寬。EGCG超聲霧化吸入組病變較輕。(4)P38MAPK在對照組中陽性表達85.44±2.88％；EGCG超聲霧化吸入組陽性表達29.81±1.94％，EGCG灌胃組的陽性表達與對照組無明顯差別，P＞0.05。JNK1在對照組陽性表達77.89±2.26％；EGCG超聲霧化吸入組陽性表達23.69±2.57％，EGCG灌胃組的陽性表達與對照組無明顯差別，P

9、＞0.05。c-Fos在對照組陽性表達45.44±3.24％；EGCG超聲霧化吸入組陽性表達15.69±1.78％，EGCG灌胃組的陽性表達與對照組無明顯差別，P＞0.05。HO-1在對照組中其陽性表達為85.33±2.45％；EGCG超聲霧化吸入組陽性表達43.19±2.83％，EGCG灌胃組的表達與對照組無明顯差別，P＞0.05。 結(jié)論：(1)EGCG超聲霧化吸入可減輕肺損傷，對油酸型ARDS兔肺具有保護作用。(2)EGCG