長(zhǎng)非編碼RNA-ANCR對(duì)三種牙源性干細(xì)胞增殖及分化的調(diào)控作用研究.pdf

1、牙源性干細(xì)胞是一類來(lái)源于牙齒組織的具有多向分化潛能和自我增殖能力的成體干細(xì)胞。牙髓干細(xì)胞（dental pulp stem cells，DPSC）、牙周膜干細(xì)胞(periodontal ligament stem cells，PDLSC)以及根尖牙乳頭干細(xì)胞（stem cells from the apical papilla，SCAP）都是非常重要的牙源性干細(xì)胞，是組織工程研究領(lǐng)域充滿潛力的種子細(xì)胞。許多因素都對(duì)牙源性干細(xì)胞的增殖分化

2、有重要的調(diào)節(jié)作用。隨著對(duì) microRNA調(diào)控作用的深入研究，學(xué)者們發(fā)現(xiàn)很多非編碼RNA都在牙源性干細(xì)胞的增殖分化調(diào)控中起著重要的作用。
　　在人類基因組中，有93％的DNA都會(huì)轉(zhuǎn)錄為RNA，但僅有2%的RNA具有編碼蛋白質(zhì)的功能，眾多的 DNA最終轉(zhuǎn)錄為非編碼 RNA。長(zhǎng)鏈非編碼 RNA（long noncoding RNA，lncRNA）過(guò)去被認(rèn)為是轉(zhuǎn)錄過(guò)程中的雜音，沒(méi)有實(shí)際作用。但近些年來(lái)，隨著研究的深入，科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)其在表

3、觀遺傳、轉(zhuǎn)錄及轉(zhuǎn)錄后基因表達(dá)中起著重要的調(diào)控作用。ANCR(anti-differetiation noncoding RNA，抗分化非編碼RNA)就是具有分化調(diào)控作用的lncRNA。但還沒(méi)有關(guān)于ANCR在牙源性干細(xì)胞分化領(lǐng)域的相關(guān)調(diào)控研究。本實(shí)驗(yàn)通過(guò)RNAi下調(diào)ANCR在牙源性干細(xì)胞中的表達(dá)，來(lái)觀察其對(duì)牙源性干細(xì)胞增殖分化的調(diào)控作用。
　　課題所取得的主要結(jié)果如下：
　　1. ANCR對(duì)DPSC的成骨、成脂、成神經(jīng)分化有重

4、要的調(diào)控作用
　　我們通過(guò)病毒轉(zhuǎn)染下調(diào)ANCR在DPSC中的表達(dá)，發(fā)現(xiàn)下調(diào)ANCR對(duì)DPSC的增殖能力無(wú)明顯影響，但可以促進(jìn) DPSC的成骨、成脂、成神經(jīng)分化，上調(diào)相關(guān)基因的表達(dá)。下調(diào)ANCR可以明顯提高DPSC的軸突形成能力。
　　2. ANCR對(duì)PDLSC的增殖、成骨、成脂、成神經(jīng)分化有重要的調(diào)控作用
　　我們通過(guò)病毒轉(zhuǎn)染下調(diào)ANCR在DPSC中的表達(dá)。對(duì)比ANCR下調(diào)后的PDLSC及正常 PDLSC后，發(fā)現(xiàn)下調(diào)

5、ANCR可以促進(jìn) PDLSC的增殖能力，并且可以促進(jìn)PDLSC的成骨，成脂，成神經(jīng)分化，上調(diào)相關(guān)基因的表達(dá)。下調(diào)ANCR促進(jìn)PDLSC的成骨分化與Wnt通路相關(guān)，是通過(guò)下調(diào)GSK3-β降解復(fù)合物來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)PDLSC的成骨分化調(diào)控。與DPSC不同的是下調(diào)ANCR后，PDLSC經(jīng)過(guò)神經(jīng)誘導(dǎo)后形態(tài)更加類似于神經(jīng)元體部。
　　3. ANCR對(duì)SCAP的成骨、成脂分化有重要的調(diào)控作用
　　我們通過(guò)病毒轉(zhuǎn)染下調(diào)ANCR在DPSC中的表達(dá)。

6、對(duì)比ANCR下調(diào)后的SCAP及正常SCAP后，發(fā)現(xiàn)下調(diào)ANCR對(duì)SCAP的增殖能力無(wú)明顯影響，但可以促進(jìn)DPSC的成骨，成脂分化，上調(diào)相關(guān)基因的表達(dá)。下調(diào)ANCR對(duì)SCAP的成神經(jīng)分化無(wú)明顯影響。
　　綜上所述，ANCR在三種牙源性干細(xì)胞（DPSC，PDLSC，SCAP）的增殖和分化過(guò)程中起著重要的調(diào)控作用，但對(duì)三種細(xì)胞的調(diào)控作用不盡相同。下調(diào)ANCR的表達(dá)會(huì)促進(jìn)DPSC的成骨、成脂、成神經(jīng)分化，PDLSC的增殖及成骨、成脂、成神