動脈粥樣硬化時血管內(nèi)皮細胞超微結(jié)構(gòu)和細胞間粘附分子-1表達的變化及阿托伐他汀治療的影響.pdf

1、本研究在采用食餌法成功建立家兔AS模型的基礎(chǔ)上，對動脈血管標(biāo)本進行形態(tài)學(xué)觀察，通過觀測實驗性家兔動脈粥樣硬化(AS)形成過程中血管內(nèi)皮細胞超微結(jié)構(gòu)及細胞間粘附分子(ICAM)-1表達的變化，以闡明ICAM-1在AS形成中的作用，同時觀察阿托伐他汀對食餌法誘導(dǎo)的血管ICAM-1表達的影響，探討他汀類藥物的部分非調(diào)脂抗動脈粥樣硬化機制。 研究方法：新西蘭純種雄性大白兔60只，按清潔級動物分籠喂養(yǎng)，體重1.8-2.4Kg,隨機分為3組

2、，即正常對照組(C組)20只：喂飼普通顆粒兔飼料；AS模型組(AS組)20只：予高脂飲食喂養(yǎng)；阿托伐他汀組(AT組)20只：高脂飲食喂養(yǎng)，同時予阿托伐他汀(4mg/kg.d)灌胃。分別于實驗開始及第2、4、6、8周末5個時間點，記錄兔體重。于實驗開始隨機抽取20只兔，空腹抽取耳沿靜脈血行有關(guān)化驗，并于試驗的2、8周末隨機處死每組兔10只，抽取下腔靜脈血，測定血脂、轉(zhuǎn)氨酶、磷酸肌酸激酶及血清可溶性ICAM-1含量，同時取胸主動脈弓處血管制

3、作石蠟切片，分別進行常規(guī)HE染色、ICAM-1免疫組化染色，并用圖像分析儀定量測量主動脈內(nèi)膜/中膜厚度比值；取胸主動脈中段標(biāo)本平鋪固定于玻片上，用原子力顯微鏡觀察內(nèi)皮細胞超微結(jié)構(gòu)的變化。 研究結(jié)果： 1.C組兔主動脈無斑塊形成。AS組及AT組動脈斑塊均隨時間延長而有所加大、增厚。但AT組病變較同期同部位的AS組輕。 2.超微結(jié)構(gòu)變化：正常主動脈中段血管內(nèi)皮細胞平行排列，與血管長軸同向，細胞呈梭形，細胞連接處為大小

4、基本一致的球狀結(jié)構(gòu)，密集排列成鋪路石狀。高脂飲食2周AS組內(nèi)皮細胞即明顯增大腫脹，細胞間隙變小，細胞連接處結(jié)構(gòu)變?yōu)槎骨v樣或橄欖球狀結(jié)構(gòu)，大小不一，體積增大，排列疏松。8周末時AS組內(nèi)皮細胞明顯變形，胞漿界限不清，部分細胞結(jié)構(gòu)消失；細胞排列紊亂，部分細胞融合，未融合處間隙明顯增大，內(nèi)皮細胞表面有時可見散在棉絮狀結(jié)構(gòu)；細胞連接處結(jié)構(gòu)形態(tài)不規(guī)則，大小極不一致。AT組內(nèi)皮細胞超微結(jié)構(gòu)也有變化，但其變化程度明顯小于同期AS組，且其形態(tài)更接近于C組

5、。 3.C組血脂在實驗前后無明顯變化，而AS組和AT組血漿血脂水平包括膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、在2周末時較實驗前及C組即均已明顯升高(p＜0.05)。但同期AT組各項血脂水平均明顯低于AS組(均p＜0.05)， 4.實驗前后及三組間血漿轉(zhuǎn)氨酶、磷酸肌酸激酶水平無明顯差別。 5.采用雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)在血清中未檢測到可溶性ICAM-1表達。 6.AS組和

6、AT組胸主動脈ICAM-1免疫反應(yīng)陽性范圍及程度均高于C組。AT組胸主動脈ICAM-1免疫反應(yīng)陽性范圍及程度均低于同期AS組。 研究結(jié)論： 1.在國際上首次應(yīng)用原子力顯微鏡觀察到，實驗性家兔AS形成中胸主動脈中段內(nèi)皮細胞超微結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯變化，內(nèi)皮細胞連接處結(jié)構(gòu)的形態(tài)和排列變化隨實驗進程而愈加明顯，但該處結(jié)構(gòu)到底是何物質(zhì)或結(jié)構(gòu)，尚待進一步研究。 2.ICAM-1在胸主動脈的表達隨AS病變加重而增強，其參與了AS的