大承氣湯對多器官功能障礙綜合征大鼠小腸平滑肌線粒體凋亡途徑和NF-kB、COX-2蛋白表達(dá)影響.pdf

1、背景:多器官功能障礙綜合征(multiple organ dysfunction syndrome，MODS)是指當(dāng)機體遭受到嚴(yán)重的燒傷、創(chuàng)傷、中毒、感染和休克等傷害后，同時或序貫發(fā)生兩個或兩個以上臟器功能失常最終衰竭的臨床綜合征。MODS不是獨立的疾病，其發(fā)病原因多，進(jìn)展快，病理機制復(fù)雜?；几共客饪萍卑Y患者一旦發(fā)生MODS，預(yù)后差，死亡率極高[1]。一般情況下，當(dāng)機體發(fā)生感染或組織損傷時，局部的炎癥反應(yīng)對清除細(xì)菌和修復(fù)損傷組織是十分必

2、要的，并且具有保護性。但若炎癥反應(yīng)異常放大，就會對機體產(chǎn)生損傷作用，導(dǎo)致自身細(xì)胞壞死、組織和器官功能障礙，最終導(dǎo)致MODS的發(fā)生[2]。因此，從本質(zhì)上來說，MODS是機體炎癥反應(yīng)失控導(dǎo)致的不良結(jié)果。而感染是炎癥反應(yīng)的促發(fā)因素，是MODS的根本原因。目前研究觀點認(rèn)為，胃腸道是MODS發(fā)生的關(guān)鍵部位。腸道是人體內(nèi)最大的“儲菌庫”和“內(nèi)毒素庫”。嚴(yán)重的損傷，如大面積燒傷、大手術(shù)、中毒、感染、嚴(yán)重的創(chuàng)傷和休克等，可導(dǎo)致消化道粘膜屏障損傷。胃腸粘

3、膜發(fā)生糜爛、潰瘍，同時胃腸道內(nèi)的細(xì)菌滋生、菌群失衡，病菌與內(nèi)毒素進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)導(dǎo)致菌血癥、內(nèi)毒素血癥甚至敗血癥。機體的炎癥反應(yīng)過度放大，發(fā)生全身炎癥反應(yīng)綜合征（systemic inflammatory response syndrome，SIRS）和MODS[3]。因此胃腸道在MODS發(fā)生發(fā)展中具有重要地位。危重癥患者的預(yù)后和胃腸運動功能恢復(fù)程度密切相關(guān)，促進(jìn)消化道運動功能恢復(fù)是救治危重癥患者的關(guān)鍵[4]。
　　目的:研究對象

4、為Wistar大鼠，建立細(xì)菌性腹膜炎致MODS大鼠模型，測定大承氣湯干預(yù)前后的MODS大鼠模型小腸平滑肌組織中的線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax，和NF-κB、COX-2蛋白的表達(dá)和分布變化。探討MODS致消化系統(tǒng)運動障礙的病理生理機制，和大承氣湯促進(jìn)MODS胃腸動力恢復(fù)的機理。
　　方法: Wistar大鼠100只（健康成年清潔級），雌雄大鼠各50只，體重200-250g。隨機分組:對照組（20只）、MODS組(40只)

5、和大承氣湯組(40只)。對照組大鼠腹腔內(nèi)注射1ml生理鹽水/只;MODS組和大承氣湯組大鼠腹腔內(nèi)注射1ml E.coli.混懸液/只，建立細(xì)菌性腹膜炎致MODS模型。其中大承氣湯組每只大鼠在造模前2天均給予大承氣湯灌胃，每次1ml/100g，2次/日。造模24小時后取存活大鼠上段小腸組織，予甲醛固定、石蠟包埋。采用免疫組織化學(xué)染色法觀察和檢測大鼠小腸平滑肌組織中線粒體凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax和NF-κB、COX-2蛋白的表達(dá)和分布

6、情況。
　　結(jié)果:大體標(biāo)本與對照組相比，MODS組大鼠胃腸梗阻癥狀明顯。大承氣湯組大鼠胃腸梗阻情況較MODS組明顯減輕，胃腸蠕動功能基本正常。
　　免疫組化法檢測①線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白Bcl-2、Bax檢測結(jié)果:與對照組比較，MODS組大鼠小腸平滑肌組織中Bcl-2蛋白表達(dá)明顯減少(P＜0.05），分布稀疏，而Bax蛋白表達(dá)明顯增多(P＜0.05），分布密集。同MODS組比較，發(fā)現(xiàn)大承氣湯組大鼠小腸肌層組織中的Bax蛋白表

7、達(dá)明顯減少(P＜0.05)，Bcl-2蛋白表達(dá)明顯增多(P＜0.05)，分布密集。②NF-κB、COX-2蛋白檢測結(jié)果:與對照組比較，MODS組大鼠小腸平滑肌組織中的NF-κB和COX-2蛋白的表達(dá)明顯增多(P＜0.05)，分布密集。同MODS組比較，發(fā)現(xiàn)大承氣湯組大鼠小腸平滑肌組織中的NF-κB和COX-2蛋白的表達(dá)明顯降低(P＜0.05)，且分布疏松。
　　結(jié)論:①細(xì)菌性腹膜炎致MODS大鼠胃腸梗阻癥狀嚴(yán)重，死亡率較高;大承氣

8、湯可以促進(jìn)消化系統(tǒng)的蠕動，使胃腸梗阻癥狀明顯緩解，降低MODS大鼠的死亡率。②MODS大鼠小腸肌層中Bax蛋白表達(dá)較對照組明顯增多，而Bcl-2蛋白表達(dá)明顯減少，線粒體凋亡途徑激活導(dǎo)致小腸平滑肌細(xì)胞凋亡，造成胃腸動力障礙;大承氣湯可以增加MODS大鼠小腸平滑肌細(xì)胞中的Bcl-2蛋白表達(dá)，減少Bax蛋白表達(dá)，通過抑制小腸平滑肌細(xì)胞線粒體凋亡途徑從而保護小腸平滑肌，恢復(fù)消化系統(tǒng)的蠕動。③MODS胃腸動力障礙可能與小腸平滑肌NF-κ B和CO