哮喘患者氣道上皮TSLP表達(dá)加重氣道炎癥的研究.pdf

1、目的:
　　 支氣管哮喘是一種由多種因素誘發(fā)的的變態(tài)反應(yīng)性疾病，以氣道高反應(yīng)性(AirwayhyperresponsivenessAHR)和慢性氣道炎癥為特征。本質(zhì)上是由多種炎癥細(xì)胞、炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子共同參與的氣道慢性變應(yīng)性炎癥，以嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)、肥大細(xì)胞、T淋巴細(xì)胞等多種炎癥細(xì)胞浸潤為特征。支氣管哮喘的發(fā)病率及死亡率呈逐年上升趨勢，嚴(yán)重威脅著公眾健康，其主要病因和發(fā)病機(jī)制十分復(fù)雜，是世界許多國家研究的熱點(diǎn)之一。

2、>　　 氣道上皮細(xì)胞構(gòu)成氣道粘膜表面的保護(hù)屏障，長期以來一直認(rèn)為氣道上皮的功能僅限于通過纖毛擺動(dòng)和黏液運(yùn)輸發(fā)揮防御作用。隨著對支氣管哮喘發(fā)病機(jī)制的深入探討，研究人員發(fā)現(xiàn)氣道上皮不僅是氣道的物理屏障，而且在氣道固有免疫和獲得性免疫反應(yīng)的起始、維持和調(diào)節(jié)中均起著重要作用。哮喘的一個(gè)重要的發(fā)病機(jī)制是樹突狀細(xì)胞(DC)介導(dǎo)的II型輔助性T細(xì)胞（Th2）優(yōu)勢應(yīng)答，Th1/Th2功能失衡，導(dǎo)致嗜酸粒細(xì)胞、肥大細(xì)胞、淋巴細(xì)胞聚集并釋放促炎因子，引起

3、氣道炎癥。
　　 胸腺間質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素（Thymicstromallymphopoietin，TSLP）是一種氣道上皮分泌的細(xì)胞因子，研究證實(shí)，哮喘患者TSLP表達(dá)增高。DC表面存在著TSLP特異性結(jié)合受體TSLPR，TSLP結(jié)合DC表面TSLPR后使DC活化并高水平表達(dá)CD40和CD80、CD86，CD40、CD80和CD86的高表達(dá)促使Tho細(xì)胞向Th2型細(xì)胞分化，導(dǎo)致Th2炎癥因子釋放增加，加重氣道炎癥，在哮喘發(fā)病中有重

4、要意義。我們試圖通過觀察哮喘患者氣道上皮TSLP的表達(dá)，探討TSLP在哮喘發(fā)病中的作用及加重哮喘氣道炎癥的機(jī)制。
　　 方法:
　　 發(fā)作期哮喘患者10例為哮喘組，健康成年人10例為對照組。兩組人員均行肺功能檢查。蘇木素伊紅(HE)染色觀察實(shí)驗(yàn)者誘導(dǎo)痰涂片變化;收集實(shí)驗(yàn)者肺泡灌洗液、采集血液，酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測對照組和哮喘組BALF上清中TSLP及血漿中IL-4、IL-5和IL-13的含量;免疫熒光法測定

5、哮喘組及對照組支氣管鏡刷檢涂片中TSLP的表達(dá)活性;流式細(xì)胞術(shù)檢測外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMCs)中CD40、CD80和CD86的表達(dá)水平。哮喘組吸入舒利迭(50/250)治療一個(gè)月后，進(jìn)一步采用流式細(xì)胞術(shù)檢測PBMCs中樹突狀細(xì)胞(DC)表面CD40、CD80和CD86的表達(dá)，ELISA法測定BALF上清中TSLP及血漿中TSLP、IL-4、IL-5和IL-13的含量。
　　 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析:采用SPSS10.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，實(shí)

6、驗(yàn)數(shù)據(jù)均以(x)±s表示，兩組間均數(shù)比較采用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，P＜0.05表示有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，P＜0.01表示有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 結(jié)果:
　　 1兩組受試者肺功能分析
　　 哮喘在未治療前肺功能未達(dá)到最佳狀態(tài)。哮喘組與對照組的年齡基本匹配，差異無顯著性意義(P＞0.05);哮喘組和對照組的基礎(chǔ)肺功能均值在正常預(yù)計(jì)值范圍內(nèi)，但哮喘組FEV1(L)、FEV1％與對照組比無顯著差異(P＞0.05);FEVl/FVC％

7、、PEF、PEF％與對照組比較差異有顯著性意義，分別為P＜0.01、P＜0.001、P＜0.001（見表1）。
　　 2痰涂片HE染色（見圖1）
　　 哮喘組痰涂片見大量嗜酸粒細(xì)胞;對照組極少見嗜酸粒細(xì)胞。
　　 3氣道上皮TSLP的表達(dá)（見圖2）
　　 對照組支氣管上皮細(xì)胞TSLP弱陽性表達(dá);哮喘組支氣管上皮細(xì)胞TSLP表達(dá)明顯強(qiáng)于正常組。
　　 4BALF中TSLP的表達(dá)（見表2）及血漿中細(xì)胞

8、因子水平的測定（見表3）
　　 哮喘組BALF中TSLP水平顯著高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.05)。哮喘組血漿中IL-4、IL-5和IL-13的水平顯著高于正常組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p＜0.01).
　　 5PBMCs中CD40、CD80、CD86分子的表達(dá)（見表4，圖3）
　　 與正常組相比，哮喘組CD40、CD80和CD86分子表達(dá)增強(qiáng)(P＜0.01)。
　　 結(jié)論:
　　 1.TS