尼妥珠單抗聯(lián)合表阿霉素對(duì)人肝癌細(xì)胞株HepG2體外生長(zhǎng)的影響.pdf

1、背景及目的:表皮生長(zhǎng)因子受體(epidermal growth factor receptor,EGFR)是一種具有酪氨酸激酶活性的生長(zhǎng)因子受體,在正常細(xì)胞表達(dá)率低,而在多種腫瘤細(xì)胞如肺癌,大腸癌,腎癌和頭頸部鱗癌等中則有過(guò)度表達(dá)。EGFR信號(hào)通路在癌癥的發(fā)生發(fā)展中起著重要作用。目前作用于EGFR信號(hào)通路的多種藥物已在腫瘤的治療中得到廣泛的應(yīng)用。文獻(xiàn)報(bào)道,在肝癌組織及癌旁組織中存在EGFR的高表達(dá),干擾肝癌細(xì)胞EGFR信號(hào)通路是否影響細(xì)

2、胞生長(zhǎng)目前尚不清楚。尼妥珠單抗(nimotuzumab,h-R3)是一種能夠識(shí)別人EGFR膜外結(jié)構(gòu)域表位的新型基因工程人源化單克隆抗體,可以特異性阻斷EGFR及其介導(dǎo)的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。為了解h-R3單獨(dú)和與化療藥物合用后對(duì)肝癌細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,本研究將h-R3與表阿霉素(epirubici,EPI)單獨(dú)和聯(lián)合作用于人肝癌細(xì)胞株HepG2，觀察它們對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。
　　方法:人肝癌細(xì)胞株HepG2傳代2-3d后進(jìn)入研究;選用

3、濃度遞增的h-R3和EPI,單獨(dú)和聯(lián)合作用于HepG2細(xì)胞,采用MTT法檢測(cè)在不同時(shí)間點(diǎn)不同藥物劑量時(shí)對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)的影響,并且計(jì)算兩者聯(lián)用時(shí)的q值,了解尼妥珠單抗與EPI聯(lián)合作用于肝癌細(xì)胞是否具有相加或協(xié)同作用;流式細(xì)胞儀PI單染法檢測(cè)細(xì)胞周期的DNA含量,分析比較單藥表阿霉素及表阿霉素聯(lián)合h-R3在不同時(shí)間誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞的凋亡率,以及h-R3和EPI作用于HepG2細(xì)胞的細(xì)胞周期分布情況。
　　結(jié)果:h-R3和EPI

4、單藥對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)均有抑制作用,并均呈時(shí)間和劑量依耐性,兩藥單獨(dú)作用72h后對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)最高抑制率分別為(49.56±8.93)％和(92.97±1.19)%,兩藥聯(lián)合對(duì)HepG2細(xì)胞生長(zhǎng)的最高抑制率為(96.44±1.0)%,聯(lián)合用藥可提高細(xì)胞增殖抑制率,通過(guò)q值提示兩藥聯(lián)合對(duì)細(xì)胞增殖抑制有相加作用;流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn),聯(lián)合組細(xì)胞凋亡率高于單藥組,并且隨時(shí)間的增加,凋亡率呈升高趨勢(shì);細(xì)胞周期檢測(cè)h-R3使細(xì)胞阻滯在G0/