表沒食子兒茶素沒食子酸酯EGCG對人肝癌細(xì)胞株HepG2體外放療的影響.pdf

1、目的：研究相同劑量EGCG聯(lián)合不同劑量放療對HepG2中hTERT基因表達(dá)和細(xì)胞凋亡的影響，探討EGCG成為放療增敏劑的可能性。
　　
　　 方法：用MTT法檢測不同濃度EGCG（10μmol/L、25μmol/L、50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L）對HepG2細(xì)胞增殖的影響；用熒光顯微鏡檢測不同濃度EGCG做HepG2細(xì)胞凋亡實驗；用實時熒光定量PCR檢測不同濃度EGCG對HepG2中hTER

2、T基因的表達(dá)的影響，從而找到合適的EGCG劑量用于觀察其體外放療的實驗。
　　 用流式細(xì)胞儀檢測不同劑量放療（0GY、2GY、4GY、6GY）聯(lián)合EGCG和不聯(lián)合EGCG治療后HepG2細(xì)胞凋亡率；用實時熒光定量PCR檢測不同劑量放療（0GY、2GY、4GY、6GY）聯(lián)合EGCG和不聯(lián)合EGCG治療后,HepG2中hTERT基因的表達(dá)。放療用直線加速器6MVX線。
　　 結(jié)果：MTT檢測結(jié)果顯示：EGCG抑制HepG2

3、細(xì)胞生長，呈濃度依賴關(guān)系（R2=0.9558，P<0.05）。熒光顯微鏡結(jié)果顯示：EGCG促進(jìn)HepG2細(xì)胞的凋亡，呈濃度依賴關(guān)系。實時熒光定量PCR結(jié)果顯示：10μmol/L組與0μmol/L組比，差異明顯（P<0.01）且對hTERT呈上調(diào)作用；25μmol/L組與0μmol/L相比差異不明顯（P>0.05），50μmol/L、100μmol/L、200μmol/L組與0μmol/L組相比，均有明顯差異（P<0.01）且對hTERT

4、呈下調(diào)作用。
　　 根據(jù)以上實驗結(jié)果，選擇25μmol/LEGCG進(jìn)行體外放療的實驗。實時熒光定量PCR結(jié)果顯示：單用25μmol/LEGCG對HepG2中的hTERT基因并無顯著影響，而經(jīng)2Gy、4Gy、6Gy放射治療后HepG2中的hTERT基因均有下調(diào)作用。0GY組與2Gy、4Gy、6Gy組均有顯著性差異（P<0.05）;2Gy組與4Gy組的差異有顯著性意義（P<0.05）,2Gy組 與6Gy組的差異有顯著性意義（P<0.

5、05）；4Gy組與6Gy組的差異無顯著性意義（P<0.05）。提示,2Gy組的差異可能更為顯著。
　　 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示：0GY組與2Gy、4Gy、6Gy組均有顯著性差異（P<0.05）;2Gy組與4Gy組的差異有顯著性意義（P<0.05）,2Gy組 與6Gy組的差異有顯著性意義（P<0.05）；4Gy組與6Gy組的差異無顯著性意義（P<0.05）。提示,2Gy組的差異可能更為顯著。