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1、目的:以廣西產(chǎn)的柚子Citrus grandis(L.)Osbeck的干燥果皮為研究對(duì)象,對(duì)其進(jìn)行系統(tǒng)的生藥學(xué)研究。通過對(duì)廣西不同產(chǎn)地的柚子皮進(jìn)行定性、定量的分析研究,為揭示其有效成分提供物質(zhì)基礎(chǔ),并為今后開發(fā)、科學(xué)評(píng)價(jià)該藥用資源質(zhì)量提供前期的科學(xué)依據(jù)。
方法:1.采集原植物進(jìn)行鑒定,并對(duì)該藥材進(jìn)行性狀和顯微鑒別。2.定性鑒別研究。采用(1)化學(xué)成分預(yù)試驗(yàn),對(duì)柚子皮中可能存在的成分進(jìn)行化學(xué)實(shí)驗(yàn);(2)紫外-可見分光光度法,分別
2、對(duì)其水、95%乙醇、50%乙醇、乙酸乙酯、石油醚(60~90℃)、氯仿提取液進(jìn)行光譜鑒別研究;(3)紅外光譜法,分為兩個(gè)部分:藥材粉末壓片和藥材提取物(浸膏)的壓片;(4)薄層色譜法,以柚皮苷為對(duì)照品,對(duì)柚子皮進(jìn)行定性鑒別。3.檢查項(xiàng)目的研究。包括浸出物檢查(水溶性浸出物,包括冷浸和熱浸;醇溶性浸出物,包括冷浸和熱浸)、水分檢查、灰分檢查(總灰分和酸不溶性灰分)。4.含量測(cè)定。(1)采用紫外-可見分光光度法對(duì)柚子皮中的總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定
3、;(2)采用HPLC法對(duì)柚子皮中有效成分柚皮苷的含量進(jìn)行測(cè)定。
結(jié)果:1.生藥學(xué)研究結(jié)果表明柚子皮在性狀、顯微鑒別方面有各自的特征點(diǎn),能用于鑒別。2.(1)化學(xué)成分預(yù)試驗(yàn)提示了柚子皮中所含的化學(xué)成分類型,其可能含有糖、多糖、苷類、有機(jī)酸、黃酮類、香豆素、內(nèi)酯、甾體或三萜類、揮發(fā)油、油脂等成分;(2)柚子皮的紫外-可見光譜具有一定的光譜特征,其光譜的零階導(dǎo)數(shù)有兩個(gè)吸收較強(qiáng)的共有峰,主要反映的是黃酮類等有共軛吸收的物質(zhì)的吸收特征。
4、一階導(dǎo)數(shù)光譜分辨能力更高,峰的數(shù)量增多,共有四個(gè)吸收峰;(3)紅外吸收光譜提供了藥材中主要官能團(tuán)的吸收情況,特別是粉末的紅外圖譜,峰比較多,可以較好的反映柚子皮中物質(zhì)的類別情況。(4)在薄層色譜中,通過對(duì)不同薄層色譜條件的選擇,最終確定使用硅膠 G薄層板,展開劑為甲苯-乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(2:2.5:5:0.5:0.5),顯色劑為5%三氯化鋁試液,結(jié)果在與對(duì)照品色譜相應(yīng)位臵上,顯相同顏色的斑點(diǎn),該方法簡(jiǎn)便、快速、重現(xiàn)性好、結(jié)果可靠
5、。3.水分含量不得高于11%。水冷浸浸出物的含量不得少于44.17%,水熱浸浸出物的含量不得少于51.45%;醇冷浸浸出物的含量不得少于28.41%,醇熱浸浸出物的含量不得少于27.47%??偦曳值暮坎坏酶哂?.00%,酸不溶性灰分不得高于0.50%。4.(1)紫外-可見分光光度法測(cè)定柚子皮中總黃酮含量:總黃酮在0.0256mg/ml~0.1536mg/ml的范圍內(nèi)(r=0.9999),線性關(guān)系良好,平均回收率為98.75%,RSD=
6、1.77%。(2)HPLC法測(cè)定柚子皮中柚皮苷的含量:柚皮苷在0.0654mg/ml~0.7848mg/ml之間線性關(guān)系良好,r=0.9999,回收率為98.66%,RSD值為0.80%。
結(jié)論:通過對(duì)柚子皮的鑒別項(xiàng)目和檢查項(xiàng)目的研究可以為柚子皮的定性提供參考依據(jù)。利用紫外-可見分光光度法測(cè)定柚子皮中總黃酮含量,方法簡(jiǎn)便、可靠、準(zhǔn)確,結(jié)果可作為柚子皮中總黃酮含量的檢測(cè)方法;利用HPLC法測(cè)定柚子皮中柚皮苷的含量,靈敏度高,專屬
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